高中生物选修1专题2微生物的培养与应用.pptVIP

2021/3/26 * 课题2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 一.基础知识原理 3.设计对照实验 目的排除无关变量对实验结果的影响,提高实验结果的可靠性 2021/3/26 * 课题2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 二.实验设计与操作 1.土壤取样 2.制备培养基 3.接种、培养、观察 4.细菌的计数 2021/3/26 * 课题2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 二.实验设计与操作 1.土壤取样 2.制备培养基 牛肉膏蛋白胨培养基—对照 选择培养基 -- 尿素为唯一氮源 2021/3/26 * 课题2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 二.实验设计与操作 3.接种、培养、观察 稀释涂布平板接种 稀释液的倍数的范围: 真菌:102～104 细菌:104～106 放线菌:103～105 每一个浓度做3个或3个以上平板,求平均值 重复实验--增强说服力和准确性 2021/3/26 * 课题2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 二.实验设计与操作 3.接种、培养、观察 时间 温度 细菌 1-2d 30～37OC 放线菌 霉菌 5-7d 25～28OC 3-4d 25～28OC 2021/3/26 * 课题2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 二.实验设计与操作 1.土壤取样 2.制备培养基 3.接种、培养、观察 4.细菌的计数 每隔24h统计一次菌落数目。 当菌落数目稳定时,选取菌落数在30-300的平板进行计数。 每同一浓度至少对3个平板进行重复计数,求平均值 再根据对应稀释的计算出样品中的细菌数 2021/3/26 * 计数 每克土壤中菌株数＝ ( C/V ) X M 平板的平均菌落数 X 稀释液的稀释倍数 涂布时所用稀释液体积 2021/3/26 * 课题2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 三.课题延伸 原理 细菌分解尿素时产生氨,氨使培养基的碱性增强。 因此,可通过检测培养基PH变化来鉴定该种细菌能否分解尿素 方法 在选择培养基中加酚红指示剂,培养细菌,观察指示剂是否变红。 －－对分离的菌种作进一步的鉴定 2021/3/26 * 课题３.分解纤维素的微生物的分离 一.基础知识－－原理 1.纤维素与纤维素酶 纤维素:一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物,广泛地存在于植物的根、茎、叶等器官中。 纤维素酶:由微生物分泌的一种复合酶,包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶,由于它们的协同作用,最终将纤维素分解成葡萄糖。 纤维素 C1酶 Cx酶 纤维二糖 葡萄糖苷 酶 葡萄糖 2021/3/26 * 课题３.分解纤维素的微生物的分离 一.基础知识－－原理 2.刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理 2021/3/26 * 二.实验设计 土壤取样 选择培养 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落 1.实验流程 课题３.分解纤维素的微生物的分离 2021/3/26 * 选择培养 将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中,将锥形瓶固定在摇床上,在一定温度下震荡培养1～2天,直至培养液变浑浊。也可重复选择培养 2021/3/26 * 刚果红染色法 思考:这两种方法各有哪些优点与不足 方法一 缺点是操作烦琐,加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂;优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用 方法二 优点是操作简便,不存在菌落混杂问题 缺点一是由于培养基中还含有淀粉类物质,可使产生淀粉酶的菌落也出现透明圈(模糊); 缺点二有些微生物具有降解色素的能力,它们在长时间培养过程中会形成明显的透明圈 2021/3/26 * 课题延伸 －－对分离的菌种作进一步的鉴定 进行发酵产生纤维素酶, 再进行纤维素酶测定 2021/3/26 * 专题2 :微生物的培养与应用 一.基础知识和基本技术 1.培养基 概念、分类、成分 3.制备培养基 计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 4.无菌技术 灭菌 消毒 5.接种技术 平板划线法 稀释涂布平板法 2.菌落 概念、特点 2021/3/26 * 专题2 :微生物的培养与应用 二.微生物培养技术的应用 2.分离微生物 方法 4.微生物的分离和鉴定 3.微生物计数 原理、方法、注意事项 原理、方法 1.纯化微生物 原理、方法 * 讲完第1点后讲课本P22中间楷体字内容引出2、3、4、内容 2021/3/26 * 微生物包括哪五类: 病毒 细菌 放线菌 真菌 原生动物 原核生物界 原生生物界 真菌界 病毒界 专题2 :微生物的培养与应用 2021/3/26 * 微生物的基础知识 微生物 病毒 真菌 原生动物 原核生物 结构简单,个体多数十分微小(光学显微镜或电子显微镜才能看到),繁殖