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- 2021-05-13 发布于上海
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薄层层析(Thin-layer chromatography,TLC);吸附层析的概念及原理;吸附层析(Absorption Chromatography);主要是利用吸附剂对不同物质吸附力的不同而达到分离的目的。
薄层层析中吸附剂选择是关键。;吸附剂的选择;吸附剂的吸附能力;常用吸附剂;是—类化学纤维原料,即锦纶(又称尼龙)。由己二酸与己二胺聚合而成。;——是由于聚酰胺的-C=O(羰基)及NH(氨基)能与被分离物质之间形成氢键。
如酚类(包括黄酮类、鞣质等)和酸类(如核苷酸、氨基酸等)是以其羟基与酰胺键的羰基形成氢键
如硝基化合物和醌类等物质与酰胺键的氨基形成氢键
被分离物质形成氢键能力的强弱,确定吸附能力的差异。
在层析过程中,展层溶剂与被分离物质在聚酰胺表面竞相形成氢键。因此选择适当的展层溶剂,使被分离物质在溶剂与聚酰胺表面之间的分配系数能有较大差异,经过吸附与解吸的展层过程,可以一一分离. ;溶剂;溶剂选择考虑因素;薄层层析的操作;2.平衡
3.展开
方法:
上行层析法
下行层析法
双向展开法;显色;荧光试剂
——DNS-Cl二甲氨基萘磺酰氯
蛋白质、多肽、氨基酸可与其游离氨基结合
DNS-aa发出黄绿色荧光;DNS-Cl在pH过高时,水解产生副产物DNS-OH,即:
;在DNS-Cl过量时,会产生DNS-NH2,即:;;三、薄层层析的应用;临床生化上的应用;DNS-
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