3.4 植物组织培养的基本方法与技术.pdf

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3.4 植物组织培养 的基本方法与技术 自然界中,植物生 长需要哪些条件呢? K N P 培养基配方 ⚫ 培养基(Culture medium) 是植物组织培养的物质基础,是组培取得成功的重要因素。 ⚫ 培养基的成分: ✓ 无机盐 ✓ 有机物 ✓ 植物生长调节物质 ✓ 支撑材料 ✓ 水 培养基配方 (一)无机营养: 是植物生长的必须元素,缺乏后生长不正常,需要均衡供给。 • 大量元素: 需要浓度较大,浓度0.5 mM N P K Mg S Ca 培养基配方 (一)无机营养: -5 -7 • 微量元素: 需要量少,浓度0.5 mM ,一般介于10 ~10 M ,过多会出现毒害 Fe B Mn Cu Mo 培养基配方 (二)有机营养: 1. 碳源:提供碳源骨架和能源,调节培养基的渗透压,包括糖类、醇类和有机酸 • 蔗糖是最好的碳源,其次是葡萄糖,果糖和麦芽糖等 2. 维生素类: 以辅酶形式参与代谢活动,对生长发育和分化有促进作用 • VB1 (盐酸硫胺素) 、VB6 (盐酸吡哆醇) 、Vpp (烟酸) 、Vc (抗坏血酸) 、生物素、叶酸等 3. 肌醇: 参与碳水化合物、磷脂代谢及离子平衡等,促进愈伤组织生长和胚状体形成 4. 氨基酸: 蛋白质的组成成分,优质有机氮,可直接被细胞吸收利用 • 最常用甘氨酸,其它如精氨酸、谷氨酸等也常用,或者水解乳蛋白、水解酪蛋白等 5. 天然复合物:成分复杂,多数含氨基酸、激素和酶等化合物 • 耶乳、香蕉汁和马铃薯汁等 培养基配方 (三)植物生长调节剂: 对于植物生长不可缺少,用量微小,是培养基中的关键物质。 细胞分裂素 生长素 脱落酸 赤霉素 多胺 多效䂳 其中最主要的是细胞分裂素和生长素 培养基配方 ⚫ 细胞分裂素的作用: 影响细胞分裂、顶端优势解除、诱导胚状体和不定芽的形成 ⚫ 细胞分裂素的种类: 6-BA (6-苄基氨基嘌呤) Kt (Kinetin 激动素) Zt (Zeatin 玉米素) TDZ (Thidiazuron N-苯基-N-1,2,3-噻二唑-5脲) 培养基配方 ⚫ 生长素的作用: 促进细胞生产和分裂、促进生根、产生顶端优势、在组培中主要用于诱导 愈伤组织形成,诱导根分化 ⚫ 生长素的种类: I

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