生物信息的传递(上)RNA的转录.pptVIP

第三章　 生物信息的传递（上）RNA的转录;一、 RNA的转录 二、启动子与转录起始 三、终止与抗终止 四、 mRNA的特征与比较 五、转录后修饰;复制和转录的异同点;不同点： 复制 转录 模板 两股链均作为模板 模板链作为模板 原料 dNTP NTP 聚合酶 DNA聚合酶 RNA聚合酶 产物 子代DNA双链 mRNA;tRNA;rRN 配对 A-T；G-C A-U；T-A；G-C ★ 引物 需RNA引物 -------- ★方式(特点) 半保留复制 不对称转录;引言;转录：以DNA为模板合成与DNA链序列完全相　　　　　　　　　　同（T－U除外）的RNA单链的过程。 主要步骤：起始、延伸、终止等 DNA分子双链的划分： 　　 编码链：不作复制模板的DNA单链，又称有义链 模板链：作复制模板的DNA单链，又称反义链;一、 RNA的转录;1、转录的基本过程;RNA酶促合成的特点： 　（1）合成原料为ATP、GTP、CTP、UTP 　（2）的RNA在NDA模板上以RNA聚合酶酶促合成 　（3）只有一条DNA链作为一个基因的RNA模板，这可用人工分子杂交试验证实。 　（4）RNA链按照5‘－3’方向（DNA链的3‘－5’）定向合成，因此RNA5‘端为三磷酸键。;2、转录机器的主要成分;RNA聚合酶催化下列反应：;RNA聚合酶的作用： 　（1） RNA聚合酶与DNA分子结合并识别DNA分子上的起始信号（全酶专一地与DNA启动子序列结合） 　　　RNA聚合酶的δ因子是识别启动子序列的主要因子，不同的δ因子使RNA聚合酶识别不同的启动子序列 　（2） RNA聚合酶使DNA双链由封闭型复合体转变为开放性复合体，使DNA局部解螺旋。 　（3）催化磷酸二酯键形成，使RNA链延长 　（4）识别DNA上的终止子序列，使RNA合成终止。;大肠杆菌RNA聚合酶的研究得比较透彻的，这是一个分子量达50多万，全酶由五个亚基组成，去掉δ亚基的部分称为核心酶，核心酶本身就能催化苷酸间磷酸二酸键形成。利福平和利福霉素能结合在β亚基上而对此酶发生强烈的抑制作用。β亚基似乎是酶和核苷酸底物结合的部位。细胞内转录是在DNA特定的起始点上开始的，δ亚基的功能是辨认转录起始点的。β’亚基是酶与DNA模板结合的主要成分。α亚基可能与转录基因的类型和种类有关。;真核生物中已发现有四种RNA聚合酶，分别称为RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和线粒体RNA聚合酶，分子量大致都在50万道尔顿左右，它们专一性地转录不同的基因，因此由它们催化的转录产物也各不相同。RNA聚Ⅰ合成RNA的活性最显著，它位于核仁中，负责转录编码rRNA的基因。而细胞内绝大部分RNA是rRNA是RNA。RNA聚合酶Ⅱ，位于核质中，负责核内不匀一RNA的合成，而hnRNA是mRNA的前体。RNA聚合酶Ⅲ负责合成tRNA和许多小的核内RNAs。 真核生物转录除RNA聚合酶外还需另一此叫做转录因子的蛋白质分子参与转录的全过程 ;（2）转录复合物;二、启动子与转录起始;　　　　　　　启动子的结构 对原核行物的100多个启动子的序列进行了比较后发现；在RNA转录起始点上游大约-10bp和-35bp处有两个保守的序列，在-10bp附近，有一组5’-TATAATpu的序列，这是Pribnow首先发现的称为Pribnow框，RNA聚合酶就结合在互部位上。-35bp附近，有一组5’-TTGACG-的序列；;　　启动基因转录的一段DNA序列。 　　不同的启动子序列有所不同，有一些共同的规律，它们一般长40－60bp，含A碱基对较多，某些段落是很相似的，这些相似的保守性段落称为共有性序列。如图所示，启动子一般可分为识别(R)、结合(B)和起始(I)三个区段。转录起始第一个碱基(通常标记位置为＋1)最常见的是A；在－10bp附近有TATAAT一组共有序列，称为Pribnow盒；在－35bp处又有TTGACA一组共有序列 。;典型的原核启动子有四大要素 转录起始位点，-10区，-35区和-10区与-35区之间的间隔。 原核基因转录起始位点：通常是嘌呤，其序列为CAT -10区：是一个6碱基保守序列（常以-10为中心）。　　　　　　T80A95t45A60A50T96，有助于DNA的解链。-35区：是另一个6碱基保守序列（常以-35为中心）。　　　　　T82T84G78A65C54a45 ;由于RNA聚合酶分子很大，大约能覆盖70b