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ELISA 灰区的设置及质控方法 ELISA 测定的阳性判断值，通常是将大量阴性和阳性人群的测定数据进行统计分析后确定 的，其确定依据为判断结果的假阳性和假阴性率最低。 在阳性判断值周围一定范围内之外的 测定结果可归为可疑，亦即 ELISA 测定的 灰区“ ”。 灰区“ ”的大小可用统计学方法确定。测定 结果处于 灰区“ ”的样本，可通过确认试验或追踪检测来确定到底是阳性还是阴性。 ”。 灰区“ ” 的大小可用统计学方法确定 ?? 具体是怎么确定的，。 或者大概粗略的方法计算是怎么样的呢？？高手在哪呢 ELISA “灰区 ”是把定量分析的正常 值范围引入定性分析而建立的概念。 灰区的设置有二种： （1 ）C.O× （1±C ）， C 为该试剂的批内 C ( 一般在 15-20% 间）； （2 ）C.O±2S ，S 为实验室做室内质控 ROC 的 S 。 另外，个人认为： ELISA “灰区 ”对于不同项目和应用的领域不同 ,其设置不能一概而论。根据 美国疾病控制中心（ CDC ）对美国 Ortho 的抗 HC 检测的 ELISA 试剂盒进行研究，发现只 有检验结果 S/CO≥3.8 时，高度预示 HC 抗体真阳性状态；若检验结果 S/CO3.8 ，存在较 高的假阳性。 在血站系统的献血员抗 HC 筛查用上述两种灰区的设置方法没有什么不可； 如果临床实验室抗 HC 的灰区也按前者设置， 势必存在较多的假阳性， 如何设置灰区应该是 值得研究和商榷的。 这位老师好，不好意思， 本人愚昧， 还不是很清楚这两种方法在实际的 应用，可否举一个小例子。比如 HBsAg0.5 是阳性，如果测量得吸光度是 0.4 的话怎么判 断，结果是阴性，但是是有很明显颜色的。在血站系统这样的血就不敢用，怎么解决呢，我 们经常遇到测量阴性但是有颜色的标本，用不同厂家的试剂或是同种试剂重复实验还是一 样，又担心存在弱抗体的问题。 怎么解决呢，万分感激国内试剂测 HBSAG 的 cutoff 值一般不会达到 0.5 ，除非不做空白。 其 cutoff 的公式一般为 NC*2.1 。我只是举例。别找问题以外的事情来说呀，我等答案等得 着急第三章 ELISA 技术的质量控制 概述 Engall 和 Perlmann 于 1971 年 首 先 建 立 了 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 （enzyme linked immunosorbent assay,ELISA ）。随着科技的发展， ELISA 在抗原、抗体、酶、固相载体及 包被技术等方面都有较大的进步， 其灵敏度和特异性均大大提高。 由于该技术具有简便、 快 速、经济等特点，因而已被广泛应用于各行业。尽管如此， ELISA 在应用过程中仍然存在 着许多难点，必须严格控制才能保证检测的质量。 ELISA 质量保证是一个复杂的过程，许多重要的环节都影响到检测的质量。现分述如下： 一、方法学的影响 ELISA 测定模式包括以下几种：双抗体夹心法、间接法、双抗原夹心法、 IgM 抗体捕捉法、 竞争抑制法， 其中竞争抑制法因受操作时差所引起的不公平竞争等因素的影响， 结果重复性 较差，质量较难控制。 二、试剂因素 1.试剂的选择 免疫检测的原理均基于抗原抗体反应。 由于该反应过程受多种因素的影响， 如普遍存在基质 效应、 交叉反应等， 因而检测结果难以溯源， 不同方法、 不同试剂之间甚至同一试剂不同批 号间结果均缺乏可比性。 试剂质量在很大程度上决定了检测的水平，