第八章真生物基因表达调控Kppt分子生物学课程网站.pptxVIP

第八章 真核生物基因 表达调控;教学目的：;第一节 概述 第二节 转录水平的调控 第三节 转录后加工水平的调控 第四节 翻译的调控;第一节 概述;原核与真核生物基因表达的差异;染色质结构 DNA的甲基化;第一节 概述 第二节 转录水平的调控 第三节 转录后加工水平的调控 第四节 翻译的调控;; 1 基因转录的顺式作用元件(cis-acting elements) 顺式作用元件：对基因表达有调节活性的DNA序列，其活性只影响与其自身同处在一个DNA分子上的基因； 通常不编码蛋白质，多位于基因旁侧或内含子中。 包括: 启动子、终止子、增强子、沉默子、静息子、转座子、效应元件等。 ;1.1 启动子;;II型启动子组成;真核启动子含有不同的序列，不同序列的位置、种类、距离和方向都不完全相同；;;1.2 增强子 Enhancer 又称远端上游序列（far upstream sequence）。 最早SV40病毒中发现，可使旁侧基因转录提高100倍。 组成：100-200bp，单拷贝或多拷贝串连形式存在。 正性调控元件，转录因子结合，促进转录。 ;;1.3 沉默子 silencer 负性调控元件， 转录因子结合抑制转录。 作用特点： 不受序列方向的影响， 能远距离发挥作用， 并可对异源基因的表达起作用。;1.4 转座子;一组受到共同调控的基因，都有一个相同的元件（序列），此元件能与某一个(类)专一蛋白因子结合，使基因对其作出反应。;;; 2 反式作用因子（trans-acting factors） 反式作用因子：通过扩散自身表达产物（酶、调节蛋白）控制其他基因的表达，其编码基因与其识别或结合的靶序列不在同一个DNA分子上。 包括：转录因子、RNA聚合酶、调控蛋白等。 2.1 反式作用因子的分类 2.2 反式作用因子的调控作用;2.1 反式作用因子的分类： (1)??通用因子，在一般细胞中普遍存在， ;(3) 诱导型因子：和效应元件（特异调控序列）结合的蛋白因子。;蛋白质和DNA相互作用； 蛋白质和配基结合； 蛋白质之间的相互作用; 蛋白质的修饰。;DNA结合域，binding domain，BD：100aa， 大沟 转录激活域，active domain，AD：30-100aa;（1） 转录激活域;（2） DNA结合域的结构花式/基元（ motif）;① 锌指（zinc finger） 由一小组保守的氨基酸和锌离子结合，形???了相对独立的功能域，像一根根手指伸向DNA的大沟。 有两种基本构型； ; ~23aa，两指间7-8aa 共有序列： Cys-X2-4-Cys-X3-Phe- X5-Leu-X2-His-X3-His 串联重复排列， 锌指数目多少不等;SP1;;B. Cys2/Cys2;表 Cys2/Cys2型的作用因子;糖皮质激素特异性;（2） DNA结合域的结构花式/基元（ motif）;② 螺旋-转角-螺旋（helix-turn-helix，HTH） 至少有两个α螺旋，其间由短肽段形成的β转角连接， 二聚体形式存在， 距离正好相当于DNA一个螺距（3.4nm），两个α螺旋刚好分别嵌入DNA的深沟。 ;许多调控蛋白都有HTH;（2） DNA结合域的结构花式/基元（ motif）;编码60aa的序列，几乎存在于所有真核生物中； 有3个?-helix, H1与H2平行 H3位于大沟中，与DNA特异结合 N端多余臂部分与小沟结合，稳定性高。; HD与HTH的不同： （1）HD的C端由3个α-螺旋构成，螺旋3结合于大沟； 而HTH至少2个α-螺旋构成； （2）HD以单体形式与DNA结合，靶序列不是回文结构， 而HTH以二聚体形式与DNA结合，靶序列是回文结构。 ;（2） DNA结合域的结构花式/基元（ motif）;④螺旋-环-螺旋结构（helix-loop-helix，HLH）;;ZIP motif Y形结构;2.2 反式作用因子的调控方式(1) 蛋白质和DNA相互作用; ;2.2 反式作用因子的调控方式;(2) 蛋白质和配基的结合 有的调节蛋白并不直接与DNA接触，而先和配基结合被活化，如甾类受体蛋白等。 ;;甾类受体蛋白通常有三个功能区;2.2 反式作用因子的调控方式;(3) 蛋白质之间的相互作用;第一节 概述 第二节 转录水平的调控 第三节 转录后加工水平的调控 第四节 翻译的调控;1 rRNA和tRNA的加工：剪切和修饰 2 mRNA加工成熟： ;真核tRNA的加工: ① 剪切、修剪和剪接； ② 甲基修饰； ③ 3’-OH连接-CCA结构。 ④ 剪接内含子； ;1 rRNA和tRNA的