ABO及Rh血型鉴定（医学课件）.pptVIP

实验一 ABO血型鉴定 Rh血型鉴定 临床检验基础与输血教研室 实　验　内　容　 一、5%红细胞悬液的配制二、ABO血型鉴定（试管法、纸片法及微柱凝胶法） 三、Rh血型鉴定及阴性确认试验 ? 一、5%红细胞悬液的配制　 原理：使用一定量的稀释液（生理盐水）稀释压积红细胞，为了遵循抗原抗体结合的量比关系，获出最佳结果。 器材:　小试管（玻璃及塑料皆可）、滴管、试管架、离心机、记号笔、显微镜。 试剂:　生理盐水。 标本:　抗凝或非抗凝静脉血。 　 操　作 1、全血2ml 1000g离心3min，分离上清（备用）； 2、压积加生理盐水约2～3ml，充分摇匀或吸管轻轻吹打混匀，再次离心去掉上清液； 3、重复洗涤红细胞3次，去掉上清液制备压积红细胞； 4、取1滴压积红细胞于1支干净的小试管中，在其中加入19滴生理盐水，用小吸管轻轻吹打混匀，就是5%的红细胞悬液。 红细胞盐水悬液用前制备，用ACD（橼酸-枸橼酸钠-葡萄糖）溶液保存最长可保存1周。 目的：掌握ABO正反定型的原理、方法。 原理：红细胞凝集试验，通过正、反定型鉴定ABO血型。 正定型：用已知血型特异性抗体（抗-A、抗-B）来测定红细胞上有无相应的抗原； 反定型：用已知血型试剂红细胞测定血清中有无相应的抗体。 二、ABO鉴定　 器材:　记号笔、小玻璃试管、滴管、试管架、离心机、鉴定纸板、载玻片、显微镜。 试剂: 1. ABO血型抗体：抗A、抗B(-A、-B)； 2．试剂红细胞：3％～5％Ac、Bc及Oc。 3. 生理盐水。 标本:　抗凝或非抗凝静脉血。 （一）试管法操作 (1)标记试管：正定型：取洁净小试管2支，分别标明－A、－B；反定型：取3支小试管，标记Ac、Bc、Oc。 (2)配5%悬浮红细胞：洗涤3次，取管底压积1滴加19滴生理盐水。 (3)加样：正定型管中分别加入1滴试剂和1滴悬红，反定型管中分别加入2滴血清和1滴试剂红细胞。 （4）离心：3000r／min离心15秒（1000×g）。 (5)结果：轻摇试管,观察有无凝集或溶血现象。 表l ABO血型正反定型结果 试剂血清+受检红细胞 受检血清+试剂红细胞 （正定型） （反定型） -A -B 受检血型 Ac Bc Oc ＋ － A 　　－ ＋ － － ＋ B 　　＋ － － － － O 　　＋ 　＋ － ＋ ＋ AB 　　－ － － 判断标准 4+ 红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。 3+ 红细胞凝集成大小块，血清清晰。 2+ 红细胞凝块分散成许多小块，血清清晰。 l+ 肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞。 ± 镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多 游离红细胞。 mf 混合凝集外观,指镜下可见少数红细胞凝集，而 极大多数红细胞仍呈分散分布。 － 阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分布。 红细胞凝集强度判断标准 9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定。*** 10、低头要有勇气，抬头要有低气。**** 11、人总是珍惜为得到。***** 12、人乱于心，不宽余请。**** 13、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。***** 14、抱最大的希望，作最大的努力。**** 15、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么。。***** 16、业余生活要有意义，不要越轨。*** 17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。**** 烦恼有何惧怕，既然躲不掉，就调好心态与它共存。心向阳光，何惧风霜。茫茫人海你我相遇就是缘分，欢迎下载！ 试管法结果判定 附：评分判断标准 4+：12分； 3+：10分； 2+：8分； l+：5分； ±：2分； mf：1分； －：0分 （二）玻片法或鉴定纸板法操作 (1)洁净玻片(鉴定纸板)一张。标-A、-B，分别用滴管滴加抗-A、抗-B试剂1滴，再加受检者3％～5％红细胞悬液l滴，混匀。 (2)另取洁净玻片(或鉴定纸板)一张。标Ac、Bc、Oc，各加受检血清2滴，再分别滴加Ac、Bc、Oc悬红1滴。 (3)室温轻转动玻片(或鉴定纸板) ，使血清与细胞充分混匀，约2min肉眼观察凝集(溶血