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- 2021-06-10 发布于天津
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专题五DNA和蛋白质技术
课题一 D N A的粗提取与鉴定
一、提取DNA的溶解性原理包括哪些方面
.DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精。
TOC \o 1-5 \h \z ①DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度有何特点要使 0?
DNA溶解,需要使用什么浓度要使 DNA析出,又需要使 寒 \ ,
用什么浓度 蟹 /
在0.14mol/L时溶解度最小;较高浓度可使 DNA溶解; ,度I
0.14mol/L可使DNA析出。 曲11浓?; V ]
②在溶解细胞中的DNA时,人们通常选用2mol/LNaCl 亘 飞9
溶液;将DNA分子析出的方法是向溶有 DNA的NaCl溶
液中缓慢注入蒸储水,以稀释 NaCl溶液。酒精是一种常用有机溶剂,但 DNA 却不能溶于酒精(特别是95%冷却酒精),但细胞中蛋白质可溶于酒精。
.从理论上分析,预冷的乙醇溶液具有以下优点。
一是抑制核酸水解酶活性,防止 DNA降解;
二是降低分子运动,易于形成沉淀析出;
三是低温有利于增加DNA分子柔韧性,减少断裂。
.采用DNA不溶于酒精的原理,可以达到什么目的 将DNA和蛋白质进一步分离。
,4.提取DNA还可以利用DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性原理。利用该原 理时,应选用怎样的酶和怎样的温度值
蛋白酶,因为酶具有专一性,蛋白酶只水解蛋白质而不会对 DNA产生影响
温度值为60?80
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