核酸的结构与功能.ppt

第 二 章核酸的结构与功能;核酸的分类及分布;第一节 核酸的化学组成以及一级结构;一、核苷酸是构成核酸的基本组成单位;碱基是含氮的杂环化合物。; 嘌呤(Pu) ;;碱基的互变异构体;（构成RNA）;嘌呤N-9或嘧啶N-1与核糖C-1?通过β-N-糖苷键相连形成核苷。;9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定。*** 10、低头要有勇气，抬头要有低气。**** 11、人总是珍惜为得到。***** 12、人乱于心，不宽余请。**** 13、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。***** 14、抱最大的希望，作最大的努力。**** 15、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么。。***** 16、业余生活要有意义，不要越轨。*** 17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。****;核苷或脱氧核苷与磷酸通过酯键结合构成核苷酸或脱氧核苷酸。;多磷酸核苷酸;环化核苷酸：cAMP、cGMP，是细胞信号转导中的第二信使。;二、DNA是脱氧核苷酸通过3,5-磷酸二酯键连接形成的大分子;5′-末端;三、RNA也是具有3, 5-磷酸二酯键的线性大分子;四、核酸的一级结构是核苷酸的排列顺序;A ;第二节 DNA的空间结构与功能 ;一、DNA的二级结构是双螺旋结构;（二） DNA双螺旋结构模型要点;DNA双螺旋结构的示意图 ;3. DNA双链之间形成了互补碱基对;大沟与小沟;（三）DNA双螺旋结构的多样性;;（四）DNA的多链结构;三链结构;四链结构;二、DNA的高级结构是超螺旋结构;（一）原核生物DNA的环状超螺旋结构;（二）真核生物DNA以核小体为单位形成高度有序致密结构;DNA染色质呈现出的串珠样结构。 染色质的基本单位是核小体。;DNA：约200bp 组蛋白：H1 H2A，H2B H3 H4;核小体串珠样的结构;;DNA经过多次折叠，被压缩了8000～10000倍，组装在直径只有为数微米的细胞核内。;真核生物的染色体;三、DNA是遗传信息的物质基础;第三节 RNA的结构与功能 ;动物细胞内主要的RNA种类及功能;一、mRNA是蛋白质合成中的模板;从AUG 开始，每三个核苷酸为一组编码了一个氨基酸，称为三联体密码(codon)。 成熟的mRNA由氨基酸编码区和非编码区构成。 5?-末端的帽子(cap)结构和3?-末端的多聚A尾(poly-A tail)结构。 ;帽子结构:m7GpppNm;真核生物的mRNA 的3?-末端转录后加上一段长短不一的聚腺苷酸。;;mRNA核内向胞质的转位 mRNA的稳定性维系 翻译起始的调控 ;3. mRNA碱基序列决定蛋白质的氨基酸序列;二、tRNA是蛋白质合成中的氨基酸载体;1. tRNA中含有多种稀有碱基;tRNA具有局部的茎环结构或发卡结构。;;tRNA的3?-末端为CCA结尾。 3?-末端的A与氨基酸以酯键相连生成氨基酰-tRNA 。 不同的tRNA结合不同的氨基酸。 ;tRNA的反密码子环上有一个由三个核苷酸构成的反密码子。 tRNA上的反密码子依照碱基互补的原则识别mRNA上的密码子。;三、以rRNA为组分的核糖体是蛋白质合成的场所;核 糖 体 的 组 成;第四节 核酸的理化性质;碱基的紫外吸收光谱;DNA或RNA的定量 A260 = 1.0 相当于 50μg/ml 双链DNA(dsDNA) 40μg/ml 单链DNA (ssDNA or RNA) 20μg/ml 寡核苷酸 确定样品中核酸的纯度 纯 DNA: A260/A280 = 1.8 纯 RNA: A260/A280 = 2.0;核酸的酸碱及溶解度性质 核酸为多元酸，具有较强的酸性。 核酸的高分子性质 粘度：DNARNA dsDNA ssDNA 沉降行为:不同构象的核酸分子的沉降的速率有很大差异，这是超速离心法提取和纯化核酸的理论基础。;二、DNA变性是双链解离为单链的过程;协同性的DNA解链;增色效应：DNA变性时其溶液OD260增高的现象。;DNA的解链曲线;解链曲线的变化;pH和离子强度不变，根据Ｇ≡Ｃ含量，;三、变性的核酸可以复性或形成杂交双链;不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中，只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系，在适宜的条件可以在不同的分子间形成杂化双链。 这种杂化双链可以在不同的DNA与DNA之间形成，也可以在DNA和RNA分子间或者RNA与RNA分子间形成。这种现象称为核酸分子杂交。;;研究DNA分子中某一种基因的位置。 监定两种核酸分子间的序列相似性。 检测某些专一序列在待检样品中存在与否。;依据底物不同分类 DNA酶：专一降解DNA。 RNA酶：专一降解RNA。 依据切割部位不同 核酸内切酶：分为限制性核酸内切酶和非特异性限制性核酸内切酶。 核酸外切酶：