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研究的背景及目的意义 研究的基本内容及方法 研究的技术路线 研究结果与讨论 主要参考文献 背景 全球生态系统尤其是近海海区或海湾生态系统的急剧恶化 ,深刻地影响着海洋生物的多样性。 海洋生物多样性一直都是研究的的热点。 浒苔作为大型经济海藻,是近海海区重要的初级生产者,浒苔共附生细菌则是重要的次级生产者和分解者,在海洋环境海洋生物地球化学循环中扮演着重要的角色(汪品先等,2006;Stefan Bertilsson et al,2011;Stefanie P.Templer et al,2011)。 藻际微生物的多样性与其生活海区环境密切相关,近海海区海洋酸化影响藻际微生物的多样性。(Whitehead et al,2008;Sapp et al,2010)。同理可推测浒苔共附生细菌会有同样表现,对其多样性的影响。 藻际微生物物种多样性决定其功能的多样性。(Fritz et al,2009;杨锐2008;单媛媛,2008;方文雅,2009)。由此可推测浒苔共附生细菌也有类似情况。 目的及意义 研究浒苔藻际共附生细菌多样性,可了解浒苔共附生细菌的群落结构和物种组成等,发现其优势类群。同时为藻类与水产养殖的病害防治提供新思路。 研究浒苔藻际共附生细菌多样性,寻找其中可作为海洋环境酸化或污染的指示菌,动态监测海洋生态环境,为海洋环境保护及开发提供指导。 研究的基本内容 采集样本的站位设定于宁海国华电厂、奉化南沙、舟山朱家尖三个不同海区的浒苔及其周围的海水样本。 利用传统的形态学方法对浒苔共附生细菌进行多样性分析。 利用分子生物学方法16srDNA测序分析浒苔共附生细菌多样性。 研究方法 相关资料的查询与阅读及其实验的设计 样本采集前的准备 样本采集及处理(样本采集过程按照标准GB12763.9的规定进行)。 样本进一步处理及细菌的分离纯化及形态观察 分子生物学16srDNA测序 数据处理与分析 技术路线 研究结果 (一)形态学多样性分析结果 三个不同海区的浒苔样品及其周围海水样品中分离得到65株细菌。 根据细菌菌落特征、菌体形态、菌落色泽和革兰氏染色等结果将其归成26种表型。 研究结果 (二)分子多样性分析结果 1. 16S rDNA测序结果 细菌结果与短波单胞菌属、假交替单胞菌属、微球菌属、深海杆菌属、Phaeobacter、Roseivirga、Salinimonas等的23个属相应菌株具有较高同源性。 细菌根据1980版《细菌分类》主要分属于变形菌门、坚壁菌门、放线菌门,其中13个属的细菌并未归属;变形菌门占70.77%(46株);厚壁菌门占7.69%(5株);放线菌门占1.54%(1株);其它占20%(13株),变形菌门占有大部分比例,且为优势类群。 研究结果 2. 16S rDNA测序结果分析 讨论 三个海区分离到的浒苔共附生细菌的物种具有明显差别,其优势类群也不尽相同。 三个海区的浒苔共附生细菌群落辛普森多样性指数分别为66.67%,88%,84.72%。 三个海区的浒苔共附生细菌优势类群均属γ-变形菌纲,南山和电厂样本共附生细菌分别归属于Pseudoalteromonas(假交替单胞菌属)、Alteromonas(交替单胞菌属),朱家尖海区样本属于…… 主要参考文献 杨锐等,条斑紫菜外生细菌的遗传多样性,海洋学报,2008.30(4):161-168 方文雅,紫菜与藻际微生物互作研究平台的构建,2008.宁波大学硕士学位论文 单媛媛,坛紫菜藻际微生物的多样性,2008.宁波大学硕士学位论文 Bell,Microbial community structure and its functional implications[J]Nature,1972.459,pp.193-199 Sapp M,Parker E R,Teal L R,Schratzberge M,Advancing the understanding of biogeography-diversity relationships of benthic microorganisms in the North Sea[J]Fems Microbiology Ecology,2010.74,pp.410-429 Whitehead H,McGill B,Worm B,Diversity of deep-water cetaceans in relation to temperature: implications for ocean warming[J]Ecology Letters,2008.11,pp.1198-1207 Fritz G,Koller C,Burdack K,Inductio
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