集中生物：《现代生物科技专题》新人教版选修.pptVIP

限制性核酸内切酶作用的是DNA分子中的什么键？;G A A T T C ;GAATTCCGTAGAATTCGGATT ;二、DNA连接酶——“分子缝合针”;2、分类;寻根问底：;三、基因进入受体细胞的载体 ——“分子运输车”;思考：;2、作用 将外源DNA携带进受体细胞后，停留在细胞中进行自我复制或整合到染色体上，随染色体DNA进行同步复制。质粒DNA分子上有特殊的遗传标记基因，如抗四环素、氨苄青霉素等标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。;基因工程的一般过程与技术;1、从基因文库中获取;① 概念：PCR全称为_______________，是一项 在生物____复制___________的核酸合成技术 ;⑥过程：;引物; 若基因较小，核苷酸序列已知，也可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。;1.用一定的_________切割 质粒，使其出现一个切 口，露出____________。 2.用_____________切断目 的基因，使其产生_____ ____________。;质粒;复制原点+目的基因+启动子+终止子+标记基因;补：原核细胞的基因结构;①不能转录为信使RNA，不能 编码蛋白质。;;真核细胞的 基因结构;;三、转化受体细胞;1、将目的基因导入植物细胞;显微注射技术;用原核细胞作为受体细胞的原因？;四、筛选出获得目的基因的受体细胞;——检查是否成功;DNA分子杂交示意图 ;第二节 基因工程的应用;1、抗虫转基因植物;2、抗病转基因植物;3、其它抗逆转基因植物;用基因重组蓝玫瑰;1、用于提高动物生长速度;2、用于改善畜产品的品质;4、用转基因动物作器官移植的供体;这些药物包括细胞因子、抗体、疫苗、激素。如 胰岛素 、白细胞介素－2、干扰素、乙肝疫苗等近20种基因工程药物 ; 体外基因治疗 先从病人体内获得某种细胞，进行培养，然后，在体外完成基因转移，再筛选成功转移的细胞扩增培养，最后重新输入患者体内。（效果较为可靠） 体内基因治疗 直接向人体组织细胞中转移基因的治病方法;4 蛋白质工程的应用;一、蛋白质工程崛起的缘由; 在已研究过的几千种酶中，只有极少数可以应用于工业生产，绝大多数酶都不能应用于工业生产，这些酶虽然在自然状态下有活性，但在工业生产中没有活性或活性很低。这是因为工业生产中每一步的反应体系中常常会有酸、碱或有机溶剂存在，反应温度较高，在这种条件下，大多数酶会很快变性失活。提高蛋白质的稳定性是工业生产中一个非常重要的课题。一般来说，提高蛋白质的稳定性包括：延长酶的半衰期，提高酶的热稳定性，延长药用蛋白的保存期，抵御由于重要氨基酸氧化引起的活性丧失等。;例如:干扰素是一种抗病毒、抗肿瘤的药物。将人的干扰素的cDNA在大肠杆菌中进行表达，产生的干扰素的抗病毒活性为106 U/mg，只相当于天然产品的十分之一，虽然在大肠杆菌中合成的β-干扰素量很多，但多数是以无活性的二聚体形式存在。为什么会这样？如何改变这种状况？研究发现，β-干扰素蛋白质中有3个半胱氨酸（第17位、31位和141位），推测可能是有一个或几个半胱氨酸形成了不正确的二硫键。研究人员将第17位的半胱氨酸，通过基因定点突变改变成丝氨酸，结果使大肠杆菌中生产的β-干扰素的抗病性活性提高到108 U/mg，并且比天然β-干扰素的贮存稳定性高很多。;“后基因组时代”将是“蛋白质组学时代”，即从对基因信息的研究转向对蛋白质信息的研究，包括研究蛋白质结构、功能与应用及蛋白质相互关系和作用。 蛋白质工程就是在对蛋白质的化学、晶体学、动力学等结构与功能认识的基础上，对蛋白质人工改造与合成，最终获得商业化的产品。;二、蛋白质工程的基本原理;蛋白质工程的主要步骤通常包括： （1）从生物体中分离纯化目的蛋白； （2）测定其氨基酸序列； （3）借助核磁共振和X射线晶体衍射等手段，尽可能地了解蛋白质的二维重组和三维晶体结构;;（一）蛋白质的分子设计与改造 蛋白质工程首先是以蛋白质的结构为基础，通过蛋白质的一级结构、晶体结构和溶液构象的研究，积累了成千上万蛋白质一级结构和高级结构的数据资料，并编制成系统的数据库，得以从中找出蛋白质分子间的进化关系、一级结构和高级结构的关系、结构与功能的关系方面的规律。; 蛋白质作为生物大分子是生物化学和分子生物学的研究重点，大量蛋白质被分离纯化，测定了它们的结构、性质和生物学作用。分子生物学有关基因组的研究，也可以用以推测出一些未知蛋白质的结构与功能。采用定位诱变的方法，可以对编码蛋白质的基因进行核苷酸密码子的插入、删除、置换和改组，其结果为分子改造