甘氨脱氧胆酸对肝癌细胞SMMC7721的增殖抑.doc

甘氨脱氧胆酸对肝癌细胞SMMC7721的增殖抑制与诱导分化 立题依据： 在肝脏损伤机制研究过程中，对胆汁酸的研究一直是国内外研究的热的。胆汁酸分为亲水性和疏水性两大类，各自具有的不同作用机制使得肝脏疾病的生理病理机制变得更为复杂。 肝癌(HCC)是最常见的恶性肿瘤之一，约占人类肿瘤的6％，每年约50万人死亡，中国占了42.5％[1]。目前对肝癌的治疗尚未有重大突破，有许多问题尚未解决，仍需进一步探索，因此寻找高效、低毒的抗癌药物，改进肝癌的治疗，控制肝癌的复发是目前的重要课题之一。在肝癌中，总胆汁酸（TBA）和甘氨结合型胆汁酸（GCBA）明显高于正常组织，在增高的胆汁酸中，以疏水性的胆汁酸为主，疏水性的胆汁酸对多种细胞具有细胞毒作用，其去垢性和毒性随疏水性的增加而增强。胆汁酸对肝脏的损伤是一个非常复杂的过程，现已证明疏水性胆汁酸对肝脏有极强的损伤作用，但机理尚不清楚。在体内体外的试验中，已经证实了疏水性胆汁酸能诱导肝细胞凋亡和在肝细胞的坏死[2].本实验室一直致力于胆汁酸的研究，在前期的研究中已经证实了疏水性胆汁酸GDCA能明显诱导肝细胞的凋亡，引起肝细胞的脂质过氧化，激活磷脂酶A2（Spla2）和细胞内钙离子浓度的增加[3，4，5]。 因此根据疏水性胆汁酸特点和对肝细胞的作用机制，我们拟对疏水性胆汁酸作用于肝癌细胞进行研究，一是探讨胆汁酸对肝癌细胞的作用机制、特点和进一步阐释肝癌的病理机制；二是胆汁酸来源广泛，且可通过自身合成和分泌，达到“以毒攻毒”的效果，是一种理想的内源性抗肿瘤药物；三是胆汁酸与其他化疗药物相比具有较低的细胞毒作用，人源化的胆汁酸能够减少机体的免疫排斥反应，提高治疗效果。我们选择了GDCA作为研究的对象，因为在人体内主要以结合型胆汁酸形式存在，且甘氨酸与牛磺酸的比例为4：1。选择肝癌细胞株SMMC-7721作为受试对象，因为该细胞株比较理想的代表了人肝癌的特点，且适合本试验的特点。 国内外研究现状和发展趋势： 国内外已有大量文献报道，疏水性胆汁酸具有很强的去垢性，即细胞毒作用，在疏水性胆汁酸在体内积聚被认为是是胆汁淤积性肝病患者肝损伤的主要原因[6]。 疏水性胆汁酸通过活化蛋白激酶C[7]、核酸内切酶，上调FAS[8]等凋亡信号途径能诱导肝细胞、结肠癌细胞、乳腺癌细胞等凋亡。目前胆汁酸的研究主要集中在胆汁酸对人或大鼠肝细胞作用机制的研究，以及亲水性胆汁酸在临床的应用研究对肝癌细胞的研究几乎还是一片空白，因此具有较高的创新性和实用性。 参考文献： 1. Luis J. Lopez and Jorge A. Marrero. Hepatocellular carcinoma Current Opinion Gastroenterology 2004, 20:248–253 2 Rodrigues CM,FanG Max,Kren BT;A nover role for ursodeoxycholic acid in inhibitory apoptosis by modulating mitochonrial perturb action.J Clin Invest 1998,101:2790-2799 3 黄文方 康格非 杨明清 涂植光 甘氨脱氧胆酸激活大鼠肝细胞磷脂酶A2和Spla2酶蛋白及Mrna水平表达的影响. 中华肝脏病杂志 2000 8：183 4 黄文方 康格非 涂植光 甘氨脱氧胆酸对肝细胞膜及脂质过氧化的作用研究 中华肝脏病杂志，1999 7:46-47 5 黄文方 康格非 涂植光 甘氨脱氧胆酸诱导大鼠肝细胞凋亡 中华肝脏病杂志，2000 8：305-306 6Marieke H,Schoemarker,Laura Corda dela Rosa;Taurosodeoxycholic Acid protects rat Hepatocyte from ile acid-induced apoptosis via activation of survival pathays; Hepatology 2004 39:1563-1573 7 Jones BA,Rao YP,Bile salt-induced apoptosis of hepatocytes involves activation of protein kinase C. AMJ Physol 1997;272(5pt1)G1109-1115 8 Faubion WA,Guicciardi ME,Toxic bile salt induced rodent hepotocye apoptosis via direct activation of Fas. J Hepatol.1998;28 99-106