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;; 1982年美国T. Cech等人发现四膜虫的rRNA前体能在完全没有蛋白质的情况下进行自我加工,发现RNA有催化活性 ; 1983年美国S.Altman等研究RNaseP(由20%蛋白质和80%的RNA组成),发现RNaseP中的RNA可催化E. coli tRNA的前体加工; Cech和Altman各自独立地发现了RNA的催化活性,并命名这一类酶为ribozyme(核酶),2人共同获1989年诺贝尔化学奖;;;;(1) 自身催化剪切型RNA;;三、 核酶的应用现状;三、 核酶的应用现状;三、 核酶的应用现状;三、 核酶的应用现状;;;;;R
Y R;;;;R
Y R;;;;;;;;;;;;;;;;;;;Ⅰ型内含子的剪接机制;IVS; ??型内含子二级结构通式;Ⅱ型内含子的剪接机制;Ⅱ类内含子有一个保守的二级结构:
结构域Ⅰ:两个保守内含子结构序列EBS1,EBS2与两个外显子结构序列IBS1,IBS2互相配对
结构域Ⅴ:高度保守,催化活性必需
结构域Ⅵ:A 提供2’-OH ; 这类RNA进行自身催化的反应是只切不接。
特点:在 Mg 2+ 或其他二价金属离子存在下,在特定的位点,自我剪切,产生5’-OH 和2’,3’-环磷酸二酯末端。;锤头型核酶的二级结构 和空间立体结构示意图;17位( X )的核苷酸残基多数是C,不能是U,G.
7位核苷酸残基的置换不会对酶活性产生很大影响
;锤头结构的 五种类型
R示酶,S示底物,箭头示剪切位点;发夹(hairpin )结构;5个环和4个螺旋形成两个结构域
剪切反应发生在底物识别序列GUC的5’端
两个内部环中的碱基及在螺旋区Ⅱ的G11和底物中的G+1都是酶发挥作用所必需的;HDV RNA斧头结构模式 ;;; Cech和Altman各自独立地发现了RNA的催化活性,并命名这一类酶为ribozyme(核酶),2人共同获1989年诺贝尔化学奖;;;;;HDV RNA斧头结构模式
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