细胞衰老与死亡PPT课件.pptVIP

Pro-caspase-2 caspase-2 Pro-caspase-6 Caspase-6 Pro-caspase-7 caspase-7 Pro-caspase-9 ICAD（抑制性 CAD） CAD（ caspase活化DNA酶） CAD进入细胞核内降解DNA 细胞凋亡 剪切细胞内结构蛋白 caspase-9 Activation of caspase-3（共同通路）(Effector caspase) Caspase-3 Pro-caspase-3 Caspase 8 二、线粒体介导的凋亡通路（mitochondrial pathway） 内部凋亡信号/外部凋亡信号 （DNA损伤） (自由基、药物、辐射) 线粒体外膜损伤、通透性改变 凋亡相关因子释放入胞质 引发细胞凋亡 线粒体是细胞凋亡调控中心 内部凋亡信号/外部凋亡信号 线粒体外膜通透性↑ 释放凋亡相关因子 （CytC 细胞色素C ） CytC 结合Apaf-1,caspase9酶原 CytC ＋Apaf-1＋caspase9酶原 （凋亡复合体 apoptosome） caspase9酶原自身切割活化 激活caspase3,caspase7 细胞凋亡 膜通透性↑、线粒体肿胀、△?m↓ Apaf-1活化 Cyt.c 线粒体途径（Intrinsic or mitochondrial pathway） Ca2+ NO 缺氧 活性氧 应激 MPT开放 Cyt.c + Pro-caspase-9 Caspase-9 ATP Apaf-1 + Apaf-1活化 Cyt.c CARD Apoptosome AIF caspase-independent apoptosis Pro-Caspase-3 凋亡 Caspase-3 Bid Caspase-8 线粒体凋亡通路中CytC的释放是关键步骤。 caspase 活化的两条主要途径： 死亡受体 ＋ 配体 caspase 8,10 死亡受体途径： 细胞凋亡 线粒体依赖途径 Apaf-1/cytC/caspase 9 活化 caspase 3,6,7 caspase 3,6,7 活化 切割活化 Bid 释放 凋亡信号 caspase 活化的其他途径（了解） 除线粒体外，Caspase的级联激活还能起始于： 内质网 细胞核 高尔基体 溶酶体 凋亡起始分子机制不清 细胞凋亡的检测 1.形态学检测 光镜、荧光显微镜、电镜——凋亡小体 2.生化特征检测 琼脂糖凝胶电泳——DNA ladder 磷脂酰丝氨酸外翻分析（Annexin V法） 3.流式细胞仪检测 简单、快捷、敏感 * 随着研究的深入，发现还存在其他细胞死亡的形式，如细胞自噬和细胞胀亡。 细胞自噬：是真核细胞中普遍存在的一种获取营养物质的现象，通过降解细胞内的衰老或破碎的蛋白质和细胞器，而产生氨基酸，以维持细胞在缺乏营养时的生存。主要特征是形成双层膜的自噬泡。 在低等生物中，受到环境胁迫因子的影响，可以诱导细胞自噬现象的产生。 细胞胀亡：形态学表现为细胞器肿胀，空泡形成，膜通透性增加，核溶解。细胞胀亡多为缺血、毒素引起。 * 细胞坏死只发生于病理情况下，如创伤、缺血、缺氧。 细胞坏死也称非正常死亡，指超过细胞可以承受的强度或阈值的环境因子引起的死亡，以及由于机体病理状态导致的细胞死亡。 这些环境因子有物理的，如高温与超低温、高渗与低渗、射线等；也可以是化学的毒物，还可以是生物的，如细菌和病毒的感染，细胞内ATP含量的降低、高浓度的ROS、BCL-2家族蛋白的表达失衡等。 细胞死亡有一定的自然过程，是一个渐进的过程，并且常有特征性的形态改变。 * 细胞凋亡多发生于生理情况下，也可发生在病理情况下。 Apoptosis来源于希腊语，apo意为“分离”，ptosis指花瓣或树叶的凋零，说明细胞死亡是自然的生理学过程。 细胞编程性死亡即在一定时间内，细胞按一定的程序发生死亡，这种死亡具有严格的基因时控性和选择性。 但也有人认为细胞凋亡与PCD有一定的区别： PCD是一个功能性概念，指某些细胞的死亡是个体发育中一个预定的，并受严格控制的正常组成部分； 凋亡是一个形态学概念，指与细胞坏死不同的受到基因控制的细胞死亡形式； PCD的结果是细胞凋亡，但细胞凋亡并非都是程序化的，如抗癌药所致的癌细胞死亡、循环负荷过重引起的细胞死亡等。 * 凋亡小体 * 1、核小体是基因组染色体的基本结构，它和连接区组成核心核小体亚单位，总长度为180-200bp。 这种DNA片段化的结果是在进行琼脂糖凝胶电泳时，凋亡细胞表现出特征性的DN