第二章核酸的结构与功能PPT课件.pptVIP

三、变性的核酸可以复性或形成杂交双链 不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中，只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系，在适宜的条件可以在不同的分子间形成杂化双链(heteroduplex)。 这种杂化双链可以在不同的DNA与DNA之间形成，也可以在DNA和RNA分子间或者RNA与RNA分子间形成。这种现象称为核酸分子杂交。 核酸分子杂交(hybridization) DNA-DNA 杂交双链分子 变性 复性 不同来源的DNA分子 三、变性的核酸可以复性或形成杂交双链 核酸分子杂交(hybridization) 第五节 核酸酶 Nuclease 核酸酶是指所有可以水解核酸的酶 依据底物不同分类 DNA酶：专一降解DNA RNA酶：专一降解RNA 依据切割部位不同 核酸内切酶：分为限制性核酸内切酶和非特异性限制性核酸内切酶。 核酸外切酶：水解位于核酸分子链末端的磷酸二酯键。5′→3′或3′→5′核酸外切酶。 核酸的酸碱及溶解度性质 核酸为多元酸，具有较强的酸性。 核酸的高分子性质 粘度：DNARNA dsDNA ssDNA 沉降行为:不同构象的核酸分子的沉降的速率有很大差异，这是超速离心法提取和纯化核酸的理论基础。 核酸在波长 260nm 处有强烈的吸收，是由碱基的共轭双键所决定的。这一特性常用作核酸的定性和定量分析。 一、核酸分子具有强烈的紫外吸收 碱基的紫外吸收光谱 DNA或RNA的定量 A260 = 1.0 相当于 50μg/ml 双链DNA(dsDNA) 40μg/ml 单链DNA (ssDNA or RNA) 20μg/ml 寡核苷酸 确定样品中核酸的纯度 纯 DNA: A260/A280 = 1.8 纯 RNA: A260/A280 = 2.0 紫外吸收的应用 增色效应(hyperchromic effect)：DNA变性时其溶液OD260增高的现象。 DNA解链时的紫外吸收变化 G+C 含量越高，解链温度就越高。 解链曲线的变化 5’ 5’ 3’ 3’ 外切位点 外切位点 内切位点 内切位点 参与DNA的合成、修复以及RNA的剪接。 清除多余的、结构和功能异常的核酸，以及侵入细胞的外源性核酸。 降解食物中的核酸。 体外重组DNA技术中的重要工具酶 。 核酸酶的功能 * * Deoxyribonucleases (or DNases) are enzymes that cleave phosphodiester bonds. Some are used for constructive purposes, such as proofreading during DNA replication, whereas others are used to degrade DNA. There are two basic classes of DNases: exonucleases and endonucleases. Exonucleases remove only the terminal nucleotide, whereas endonucleases cleave anywhere within the DNA double helix. DNA染色质呈现出的串珠样结构。 染色质的基本单位是核小体(nucleosome)。 DNA染色质的电镜图像 核小体的组成 DNA和组蛋白组成 核心颗粒: 组蛋白八聚体、DNA盘绕1.75圈 连接区: DNA、组蛋白H1 6个核小体盘绕成螺线管 三、DNA是遗传信息的物质基础 DNA的基本功能是以基因的形式储存、传递、表达遗传信息。 基因（gene)是指DNA中的特定区段中的核苷酸排列顺序。 第三节 RNA的结构与功能 Structure and Function of RNA RNA由一条多核苷酸链组成，可形成局部双螺旋二级结构和三级结构 RNA比DNA小的多 RNA的种类、大小和结构远比DNA表现出多样性 RNA的种类、分布、功能 hnRNA mRNA 内含子 （intron） 外显子 （exon） 信使RNA(messenger RNA, mRNA)成熟过程 不均一核RNA(hnRNA) hnRNA经过剪切后成为成熟的mRNA。 一、mRNA是蛋白质合成中的模板 由编码区和非编码区构成。 5?-末端的帽子(cap)、3?-末端的多聚A尾(poly-A tail) 。 成熟的真核生物mRNA 一、mRNA是蛋白质合成中的模板 （一）编码区 AUG被称为起始密码子；UAA、UAG、UGA称为终止密码子。 从mRNA分子5末端起的第一个AUG开始，每3