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分子生物学简答题
试述乳糖操纵子的阻遏作用、诱导作用及正调控。
阻遏作用:阻遏基因lacl转录产生阻遏物单体,结合形成同源四体,即阻遏物。它是一个抗解链蛋白,当阻遏物与操纵基因O结合时,阻止DNA形成开放结构,从而抑制RNA聚合酶的功能。lacmRNA的转录起始受到抑制。
诱导作用:按照lac操纵子本底水平的表达,每个细胞内有几个分子的β-半乳糖苷酶和β-半乳糖苷透过酶。当加入乳糖,在单个透过酶分子的作用下,少量乳糖分子进入细胞,又在单个β-半乳糖苷酶的作用下转变为诱导物异构乳糖,诱导物通过与阻遏物结合,改变它的三维构象,使之因不能与操纵基因结合而失活,O区没有被阻遏物占据从而激发lacmRNA的合成。
调控作用:葡糖糖对lac操纵子的表达的抑制是间接的,不是葡萄糖本身而是其降解产物抑制cAMP的合成。cAMP-CAP复合物与启动子区的结合是lacmRNA转录起始所必须的,因为该复合物结合于启动子上游,能使DNA双螺旋发生弯曲。有利于形成稳定开放型启动子-RNA聚合酶结构。如果将葡萄糖和乳糖同时加入培养基中,lac操纵子处于阻遏状态,不能被诱导
试述 E.coli的RNA聚合酶的结构和功能。
2个α亚基、一个β亚基、一个β’亚基和一个 亚基组成的核心酶,加上一个 亚基后则成为聚合酶全酶
α亚基:核心酶组装、启动子识别
β和β’亚基:β和β’共同形成RNA合成的催化中心
因子:存在多种 因子 ,用于识别不同的启动子
试述原核生物DNA复制的特点。
1.原核只有一个起始位点。2.原核复制起始位点可以连续开始新的复制,特别是快速繁殖的细胞。3.原核的 \t/_blank DNA聚合酶III复制时形成 \t/_blank 二聚体复合物。4.原核的 \t/_blank DNA聚合酶I具有5-3外切 \t/_blank 酶活性
DNA解旋酶 通过水解ATP 产生能量来解开双链DNA
单链结合蛋白 保证被解链酶解开的单链在复制完成前保持单链结构
DNA拓扑异构酶 消除解链造成的正超螺旋的堆积,消除阻碍解链继续进行的这种压力,使复制得以延伸
真核生物hnRNA必须经过哪些加工才能成为成熟的mRNA,以用作蛋白质合成的模板?
(1)、在5’端加帽,5’端的一个核苷酸总是7-甲基鸟核苷三磷酸(m7Gppp)。?
(2)、3’端加尾,多聚腺苷酸尾巴。准确切割?,加poly(A)?(3)、RNA的剪接,参与RNA剪接的物质:snRNA、snRNP?(4)、RNA的编辑,编辑(editing)是指转录后的RNA在编码区发生碱基的突变、加入或丢失等现象。?
(5.)、RNA的再编码,mRNA有时可以改变原来的编码信息,以不同的方式进行翻译?
(6.)、RNA的化学修饰?,人细胞内rRNA分子上就存在106种甲基化和95种假尿嘧啶产物。?
真核生物的RNA聚合酶有哪几种?分布在细胞的什么位置?各有什么功能?
RNA聚合酶:核仁 负责三种主要的 rRNAs的转录:28S、18S、5.8S
RNA聚合酶:核质 负责转录生成 mRNAs及一些snRNAs
RNA聚合酶:核质 负责转录转录生成 tRNAs、5SrRNA、snRNAs
增强子的特点及对DNA 转录的作用。
增强或促进转录起始
影响模板附近的DNA双螺旋结构,导致DNA双螺旋弯折或在反式因子的参与下,以蛋白质之间的相互作用为媒介形成增强子与启动子之间的成环连接,活化基因转录
将模板固定在细胞核内特定位置,有利于DNA拓扑异构酶改变DNA双螺旋结构的张力,促进RNA聚合酶在DNA链上的结合和滑动
增强子区可以作为反式作用因子或RNA聚合酶进入染色质结构的入口
试述原核生物转录终止的两种机制。
转录的终止有两种机制。一是需要蛋白质因子ρ(Rho)的参与,ρ因子能与转录中的RNA结合,启动ρ因子ATP酶活性,并向RNA的3’端滑动,划至RNA附近时, RNA聚合酶暂停聚合活动,使RNA:DNA解链分离转录的RNA释放种植转录。另一是在立体系统中发现的,纯化的的 RNA聚合酶不需要其他蛋白质因子的参与,可使转录终止,即不依赖ρ因子的转录终止机制,模板DAN在转录终止点附近有特殊核苷酸序列可以形成颈环结构影响 RNA聚合酶的构象使转录暂停,DAN与RNA双链不稳定分离,转录终止。
指出摆动假说中密码子与反密码的变偶碱基对是什么?怎样进行变偶配对?
密码子与反密码子的配对中,第一对和第二对碱基严格遵守碱基互补配对原则,第三位碱基有一定自由度,可以“摆动”,因而使某些tRNA可以识别一个以上的密码子。一个tRNA究竟能识别多少个密码子是由 反密码子的第一位碱基的性质决定的,反密码子第一位为A或C时只能识别1种密码子,为G或U时可以识别2种密码子,为I 时可识别三种密码子。如果
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