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WB 所需溶液的配制
1 Tris- 甘氨酸电泳缓冲液 ( Running buffer) 5 X
Tris base 15.14g
Glyci ne （甘氨酸 ） 72.0g
SDS 5.0g
蒸馏水 溶解至 1000ml
5X Tris- 甘氨酸电泳缓冲液： 15.1g Tris 碱和 72g 甘氨酸， 5g 电泳级的 SDS , 双 蒸水
定容至 1L，pH 值为 8.3 。使用前，将 5X 稀释到 IX ：取 200ml 5 X ，定容到
1000ml 。
2 转膜缓冲液 （Sending buffet ）（现用现配）
1000 ml 1500 ml
Glyci ne （甘氨酸 ） 14.413 g 21.6 g
1.0 M Tris.HCl (pH8.3) 25 ml 37.5ml
10% SDS 1 ml 1.5 ml
甲醇(methanol) 200 ml 300 ml
蒸馏水 溶解至 1000 ml 溶解至 1500 ml
必须新鲜配置，因为甘氨酸溶于水后易分解。小片段可不加 SDS 。
3 10% SDS 配置
i2 25 4
电泳级 十二烷基硫酸钠也叫 SDS （ Sodium Dodecyl Sulfate ，SDS,C H O NaS ）
溶液 ：10g SDS, 100ml 去离子水配制， 50-68 度搅拌溶解，浓盐酸调 pH 到 7.2 ， 室
温保存。
4 Tris.HCI 的配置
1.0M Tris.HCl (pH8.8) Tris 30.28 g 加入到 250ml 水 浓盐酸调 pH 到 8.8
中
1.5 M Tris.HCl (pH8.8) Tris 45.43 g 加入到 250ml 水 浓盐酸调 pH 到 8.8
中
1.0 M Tris.HCl (pH6.8) Tris 30.28 g 加入到 250ml 水 浓盐酸调 pH 到 6.8
中
1.0 M Tris.HCl (pH8.3) Tris 30.28 g 加入到 250ml 水 浓盐酸调 pH 到 8.3, 需
中 要大约 8 毫升。
注： Tris 的分子量是 121.4. 4 度储存。
5 10% APS (Ammonium persulfate ; 过硫酸铵 ) 的配置
称取 1g 过硫酸铵，加超纯水溶解并定容至 10ml ，分装到 1.5ml 微量离心管中， 负
30 度冻存。使用时尽量现配现用，短期内实验频繁可多配。 4 度存则两周内
用完，最多不能超过一个月。负 20 度可存两个月，但一旦解冻后尽快用完。
6 10 x TBS 仃 ris-buffered saline) 的配置
NaCl 80 g 160 g
Tris base
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