微生物检验基本技能课件.pptVIP

( 六 ) 真空冷冻干燥法 (4) 预冻 分装好的安瓿管需要进行预冻，即放在 -30 ～ 40 ℃下冻结 20 ～ 60min ，也可以用干冰和无水乙醇冻 5 ～ 10min 。 (5) 冷冻干燥 经预冻的安瓿放入干燥箱中开始抽真 空干燥。此时干燥箱温度控制在 -30 ℃以下，并尽快 使真度达到 66Pa 以下。此后可还渐升温以加速水分升 华，但升温不宜过快，以免引起样品融化。干燥时间 视冻干机效率、样品装量及性质等而寂，以样品最终 水分含量达到 1% ～ 3% 为准。具体操作时是根据冻干样 品呈酥块工松散片状；真空度接近空载时最高真空； 样品温度与管外温度接近。 空下用火焰烧熔密封，并用高频真空检测真空度。 ( 六 ) 真空冷冻干燥法 (6) 保藏及冻干管的启用 密封好的冻干管在 4 ℃或 -18 ℃下保藏。当需用冻干菌种时，取出安 瓿管用酒精表面消毒，用小砂轮在无菌条件下打 开，或将安瓿顶部在酒精灯火焰上灼烧，迅速滴 上冷的无菌水，使管破裂，然后用镊子等轻轻敲 碎管口，加入 0.3 ～ 0.5ml 液体培养基溶解冻干菌 块成为悬液，用无菌滴管或接种环移至斜面或液 体培养基进行培养。 ( 七 ) 液氮超低温保存 本方法是近年推广使用的一种菌种保存法。大多数 微生物如病毒、噬菌体，立克氏体，各种细菌、放细菌、 支原体，各种丝状菌、酵母、藻类和原虫，特别是一些无 法用冻干保存的微生物