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消毒及灭菌的方法
消毒及灭菌的定义:
消毒定义: 利用化学或物理方法, 杀死大部份致病微生物的过程。 区分为高程度消毒( High-level Disinfection ) 、 中 程 度 消 毒 ( Intermediate-level Disinfection )、低程度消毒( Low-level Disinfection )三种方式。
灭菌的定义:以化学剂或物理方法消灭所有微生物,包括所有细菌的繁殖体、芽孢、霉菌及病毒,而达到完全无菌之过程。
灭菌消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。几种非热灭菌技术 :
冷冻真空干燥 (vacuo-lyophilization) 灭菌
冷冻:- 20 ℃以下,细胞原生质内水分结冰,破坏其胶体状态并机械挤压,刺伤菌体而死亡。
真空:抽去空气呈低氧或绝氧状态,抑制正常呼吸
干燥:导致菌体脱水和盐类浓度增高,抑制代谢活动正常进行
微波(microwave) 灭菌
微波:是频率范围为 300~300000MHz 的无线电波,与其他波段的无线电波相比,其具有波长短,振荡周期短,似光波性和频率很高等特点。
微波灭菌机理:微波的热效率高;介质分子振荡旋转速度快;菌体脱水,蛋白质凝固;染色体、细胞膜、酶系统发生变性。
γ射线( γ-ray radiation) 灭菌
γ射线:是一种波长非常短能量非常大, 有强烈穿透力使物质产生电离作用的电磁波。
γ射线灭菌机理:低剂量的 γ射线诱发生物变异。高剂量 γ射线使水分子电离, 生成具有强氧化性的 H+ 和强还原性的 OH -,直接作用菌体细胞本身;电离产生的电子和环境的分子氧结合, 氧化菌体内酶的化学基团使酶失活; 辐射能导致DNA 降解或其他物质分解,造成死亡。
化学熏蒸( fumigating )灭菌法
化学熏蒸的概念: 在一定温度和压力的密闭条件下, 化学毒剂由固态或液态迅速转成气态渗透到生物体内,使生物致死。
常用熏蒸灭菌剂
甲醛( HCHO )
R— NH2 + HCHO R — NH2 ?CH2O
甲醛的灭菌机理在于它的还原作用与蛋白质的氨基结合使其变性, 从而破坏了酶系统和细胞膜、细胞壁的结构
环氧乙烷 (CH2OCH2)
R— SH + CH2OCH2 R — S— CH2CH2OH
环氧乙烷的灭菌机理在于它与蛋白质的氨基、羟基、酚基和巯基结合使其变性, 抑制氧化酶和脱氢酶的活性,破坏菌体正常代谢
熏蒸设备:简易消毒箱、真空熏蒸机、熏蒸消毒室高压杀菌技术
所谓高压杀菌是指将食品放人液体介质中, 加 100MPa - 1000MPa 的压力作用
一段时间后, 如同加热一样, 杀灭食品中的微生物的过程。 高压灭菌通常认为蛋白质在高压下立体结构 (四级结构) 崩溃而发生变性而使细菌失活, 但也有人认为凡是以较弱的结合构成的生物体高分子物质如核酸、 多糖类、脂肪等物质或细胞膜都会受到超高压的影响, 尤其通过剪切力而使生物体膜破裂, 从而使生物体的生命活动受到影响甚至停止,这就可以达到灭菌、杀虫和效
高压脉冲电场杀菌技术
高压脉冲技术用于食品灭酶灭菌, 主要原理是基于细胞结构和液态食品体系间的电学特性差异。 当把液态食品作为电介质置于电场中时, 食品中微生物的细胞膜在强电场作用下被电击穿, 产生不可修复的穿孔或破裂, 使细胞组织受损, 导致微生物失活。证实在脉冲电场强度为 12 -40 Kv /cm ,脉冲时间为 20 μs- 18 μs 的条件下,可有效地对食品进行灭菌,且以双矩形波最为有效。
脉冲强光杀菌技术
脉冲强光杀菌是利用强烈白光闪照的杀菌技术, 其系统主要包括动力单元和灯单元,动力单元为惰性气体灯提供能量, 灯便放出只持续数百微秒, 其波长由紫外光区域至近红外光区域的强光脉冲, 其光谱阳光相似, 但比阳光强几千倍至数万倍。由于只处理食品表面,从而对食品营养成分影响很小, JosephDunn 等人研究表明,脉冲强光对多数微生物有致死作用。
物理方法
1 、温度 利用温度进行灭菌、消毒或防腐,是最常用而又方便有效的方法。 高温可使微生物细胞内的蛋白质和酶类发生变性而失活, 从而起灭菌作用, 低温
通常起抑菌作用。1)干热灭菌法 :
灼烧灭菌法:利用火焰直接把微生物烧死。此法彻底可靠,灭菌迅速,但易焚毁物品,所以使用范围有限,只适合于接种针、环、试管口及不能用的污染物品或实验动物的尸体等的灭菌。
干热空气灭菌法: 这是实验室中常用的一种方法, 即把待灭菌的物品均匀地放入烘箱中,升温至 160 °C,恒温 1 小时即可。此法适用于玻璃皿、金属用具等的灭菌。
2)湿热灭菌法 :
在同样的温度下, 湿热灭菌的效果比干热灭菌好, 这是因为一方面细胞内蛋白质含水量高, 容易变性。 另一方面高温水蒸汽对蛋白质有高度的穿透力, 从而加速蛋
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