2021年PEG诱导细胞融合.docxVIP

精品学习资料 名师归纳总结——欢迎下载 科目细胞生物学试验试验题目动物细胞融合日期2021.03.07姓名系年级 2021 级生物基地学号******试验一利用聚乙二醇为媒介物进行细胞融合摘要细胞融合 (cell fusion)是在自发或人工诱导下，两个不同基因型的细胞或原 生 质 体 融 合 形 成 一 个 杂 种 科目 细胞生物学试验 试验题目 动物细胞融合 日期 2021.03.07 姓名 系年级 2021 级生物基地 学号 *** *** 试验一 利用聚乙二醇为媒介物进行细胞融合 摘要 细胞融合 (cell fusion) 是在自发或人工诱导下，两个不同基因型的细胞或 原 生 质 体 融 合 形 成 一 个 杂 种 细 胞 ； 基 本 过 程 包 括 细 胞 融 合 形 成 异 核 体 (heterokaryon) 胞； ，异核体通过细胞有丝分裂进行核融合， 最终形成单核的杂种细 诱导细胞融合的方法有三种： 生物方法（病毒），化学方法 （聚乙二醇 PEG）， 物理方法（离心，震惊，电刺激） ；某些病毒如：仙台病毒，副流感病毒和新城 鸡瘟病毒的被膜中有融合蛋白（ fusion protein ），可介导病毒同宿主细胞融合， 也可介导细胞与细胞的融合，因此可以用紫外线灭活的此类病毒诱导细胞融合； 化学和物理方法可造成膜脂分子排列的转变， 去掉作用因素之后， 质膜复原原有 的有序结构，在复原过程中便可诱导相接触的细胞发生融合； 关键词 细胞融合；人工诱导； PEG 前言 人工诱导的细胞融合， 在六十岁月作为一门新兴技术而进展起来； 由于它不 仅能产生同种细胞融合， 也能产生种间细胞的融合， 因此细胞融合技术目前被广 泛应用于细胞生物学和医学讨论的各个领域； 基因型相同的细胞融合成的杂交细 胞称为同核体（ homokaryon ）；来自不同基因型的杂交细胞就称为异核体 （ heterokaryon ）； 细胞融合不仅可用于基础讨论， 已经胜利的有萝卜 +甘蓝，粉蓝烟草 一个重要应用就是制备单克隆抗体， 而且仍有重要的应用价值， 在植物育种方面 +郎氏烟草，番茄 +马铃薯等等；细胞融合另 单克隆抗体可以用作诊断试剂， 治疗疾病和 运载药物，具有精确，高效，简易，快速等优点；因此，融合细胞的讨论为生物 学无论在基础理论上或生产实践上开创了一条新的道路； 胞遗传，细胞免疫，肿瘤和生物新品种培育的重要手段； 这一技术已成为讨论细 一． 试验目的 1. 2. 3. 明白动物细胞融合的常用方法及原理； 把握利用 PEG为介导物对细胞进行诱导融合的方法； 观看动物细胞融和过程中细胞的行为和变化； 二． 试验原理 第 1 页，共 5 页 精品学习资料 名师归纳总结——欢迎下载 化学融合剂聚乙二醇 (polyethylene glycol，PEG是) 乙二醇的多聚化合物， 是存在一系列不同分子量的多聚体；PEG可诱导细胞间的融合，主要有两方面的缘由：第一， PEG可以破坏和干扰各类细胞的膜结构，使两细胞相互接触部位的膜脂双层中磷脂分子发生疏散，进而使其结构发生重排， 再加上膜脂双层的相互亲合以及彼此间表面张力的作用，引起相邻的重排质膜在修复时相互合并在一起,使两细胞的胞质沟通 ,从而造成相互接触的细胞之间发生融合；其次，PEG 可与水分子借氢键结合，在高浓度的PEG溶液中自由水消逝，导致细胞脱水而发生质膜结构的变化，引起细胞融合；为了发挥PEG 促进细胞融合的效力，必需采用较高浓度的 PEG 溶液，但在高浓度 PEG 溶液下，细胞可能因脱水而受到显著的破坏；因此，挑选合适的分子量 化学融合剂聚乙二醇 (polyethylene glycol，PEG是) 乙二醇的多聚化合物， 是存 在一系列不同分子量的多聚体； PEG可诱导细胞间的融合，主要有两方面的缘由： 第一， PEG可以破坏和干扰各类细胞的膜结构，使两细胞相互接触部位的膜 脂双层中磷脂分子发生疏散， 进而使其结构发生重排， 再加上膜脂双层的相互亲 合以及彼此间表面张力的作用，引起相邻的重排质膜在修复时相互合并在一起 , 使两细胞的胞质沟通 ,从而造成相互接触的细胞之间发生融合；其次， PEG 可与 水分子借氢键结合，在高浓度的 PEG溶液中自由水消逝，导致细胞脱水而发生 质膜结构的变化，引起细胞融合；为了发挥 PEG 促进细胞融合的效力，必需采 用较高浓度的 PEG 溶液，但在高浓度 PEG 溶液下，细胞可能因脱水而受到显著 的破坏；因此，挑选合适的分子量，浓度及作用时间是 PEG 融合技术的关键； 利用PEG诱导细胞融合 ,其融合成效受以下几个因素的影响： 1.PEG的分子量：细胞融合成效与 PEG的分子量成正比，但 PEG的分子量越大， 对细胞的毒性就越大；在试验经经常