消化毒剂的作用机理.pptVIP

第七节 消化毒剂的作用机理;一、 Bt内毒素;;1. Bt杀虫晶体蛋白（Isecticidal Crystal Proteins，ICPs）; 晶体蛋白有130多种，按照杀虫范围和寄主同源型又可分为两大类群，即Cry 蛋白和Cyt蛋白。 Cry在活体和离体条件下只对鳞翅目、双翅目或鞘翅目有效； Cyt活体条件下只对双翅目有效，而离体条件下具有广谱性。 Cry分为四大类（根据杀虫谱）：CryI（鳞翅目）、CryII(鳞翅目和双翅目)、CryIII（鞘翅目）和CryIV(双翅目)。 通常一种毒素只能杀死某一目的部分易感昆虫，对有益生物和脊椎动物安全。; ???整的毒蛋白一般由三个结构域组成。 结构域Ⅰ由一个α-螺旋束组成，可能与细胞膜穿孔有关； 结构域Ⅱ由三组β-折叠片层组成，可能参与了毒素与膜受体蛋白的识别和结合； 结构域Ⅲ位于毒素分子C-端，则可能能够防止昆虫肠道蛋白酶对毒性肽分子的进一步降解。 ;;2. Bt毒素受体蛋白; δ-内毒素的作用过程要经溶解、酶解活化、与受体结合、插入、孔洞或离子通道形成等五个环节。; 毒素的溶解 晶体蛋白可以溶解于pH 12或pH 9.5并加有巯基试剂的碱性溶液中。中肠内环境诸如pH值、还原电势、去垢性、体积等都可能影响δ-内毒素在昆虫体内的溶解性。鳞翅目幼虫的中肠pH值一般都较高，呈碱性, 对δ-内毒素的溶解很有利。; 毒素的活化 溶解的晶体蛋白被中肠蛋白酶水解，由130kD左右的前毒素，打开二硫键，释放出N 端的70kD左右的抗酶多肽活力片段。 活力片段至少由两部分组成, 即毒力片段和细胞结合片段。毒力片段位于N端, 由几个保守的亲水区组成，主要结构是α-螺旋，对于跨膜通道的形成及毒效可能起着重要作用。细胞结合片段由C端的保守区和中间的可变区组成，主要结构是β-片层，负责毒素与靶标昆虫受体的结合，从而决定了毒素的选择性。中肠酶液的组成直接影响到δ-内毒素的降解活化, 对δ-内毒素作用的专一性起着重要作用。 ;毒蛋白的活化过程;3 杀虫晶体蛋白的作用机理 ; 插入及孔洞或离子通道的形成 δ-内毒素与刷状缘膜上的受体结合后，结构域Ⅰ插入膜内，形成孔洞或离子通道，导致膜完整性的破坏，引起离子渗漏，水随之进入细胞，细胞因膨胀而解体、死亡。 ;(+);3 杀虫晶体蛋白的作用机理 ;α-5螺旋;3 杀虫晶体蛋白的作用机理 ;3 杀虫晶体蛋白的作用机理 ; 不同品系的Bt由于产生的Cry蛋白类型不同，不仅杀虫谱不同，而且很可能拥有不同的作用方式。总之，Bt内毒素在进入昆虫中肠后，先是在碱性条件下溶解，然后被活化为小分子多肽,再与中肠内膜上的刷缘状膜小泡（BBMV）中特异受体结合，毒素分子插入质膜形成一个微孔，以离子和小分子渗入，这些微孔因渗透肿胀而变大，最终细胞破裂。昆虫中肠上皮细胞死亡，肠壁受损，肠道内容物进入血淋巴，直接造成血淋巴pH值上升可使昆虫麻痹死亡；毒性肽进入血淋巴可使昆虫患毒血症死亡；活细胞或孢子进入血腔可使昆虫患败血症死亡。 ;;二氢沉香呋喃类化合物：苦皮藤素Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ等可致粘虫：中肠柱状细胞的微绒毛排列不整齐，大量脱落；基膜内褶空间变大，排列紊乱；细胞质密度降低；内质网极度扩张 ，囊泡化，核糖体脱落；线粒体嵴模糊不清楚，双层膜不完整。推测其机理为：此类化合物与昆虫中肠细胞膜及内膜结合，膜系统结构发生改变，水分和各种离子的通透性随之改变，引起细胞肿胀、失水、瓦解，最终死亡。推测其机理为：此类化合物与昆虫中肠细胞膜及内膜结合，膜系统结构发生改变，水分和各种离子的通透性随之改变，引起细胞肿胀、失水、瓦解，最终死亡。 ;鬼臼毒素类化合物