分子生物学实验室常用仪器及使用方法.pdfVIP

实验指导 目 录 实验一 分子生物学实验室常用仪器及使用方法 实验二 质粒 DNA的提取－碱裂解法 实验三 琼脂糖凝胶电泳 实验四 限制性内切核酸酶的酶切与鉴定 实验五 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 实验六 动物组织细胞基因组 DNA 提取 实验七 DNA 的定量 实验八 PCR 基因扩增 实验九 琼脂糖凝胶电泳分离与纯化目的 DNA 实验十 DNA 重组 实验十一 动物组织细胞总 RNA的提取 实验一 分子生物学实验室常用仪器及使用 事实证明， 在科学飞速发展的今天， 无论从事哪个领域的研究，要想突破，除了有 良好的理论基础外，更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。 一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外， 还具有一些特 殊用途的仪器， 这些仪器一般较精密， 价格昂贵。 下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。 一、冷冻离心机 低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。基因片段的分离、酶蛋白 的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术， 因此低温冷冻离 心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。 在国内， 有多个厂家生产冷冻离心机， 本实验 室的高速冷冻离心机为 GL-20G- Ⅱ型（上海安亭） ，落地式。配有角式转头： 6 ×50ml 、12 × 10ml 和 12× 1.5ml 。极限转速 20000rpm。 1. 安装与调试 离心机应放置在水平坚固的地面上，应至少距离 10cm 以上且具有良好的通风环境 中，周围空气应呈中性，且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体，环境温度应在 0～30 ℃ 之间，相对湿度小于 80%。试转前应先打开盖门，用手盘动转轴，轻巧灵活，无异常现象方 可上所用的转头。转子准确到位后打开电源开关， 然后用手按住门开关，再按运转键， 转动 后立即停止，并观察转轴的转向，若逆时针旋转即为正确，机器可投入使用。 2. 操作程序 （1）插上电源， 待机指示灯亮； 打开电源开关，调速与定时系统的数码管显示的闪烁数 字为机器工作转速的出厂设定，温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。 （2 ）设定机器的工作参数，如工作温度，运转时间，工作转速等。 （3 ）将预先平衡好的样品放置于转头样品架上，关闭机盖。 （4 ）按控制面板的运转键，离心机开始运转。在预先设定的加速时间内，其运 速升 至预先设定的值。 （5）在预先设定的运转时间内（不包括减速时间） ，离心机开始减速，其转速在预先设 定的减速时间内降至零。 （6）按控制面板上的停止键，数码管显示 dedT，数秒钟后即显示闪烁的转速值，这时 机器已准备好下一次工作。 3. 注意事项 （1）离心机应始终处于水平位置，外接电源系统的电压要匹配，并要求有良好的接地 线，机器不使用，要拔掉电源插头。 （2 ）开机前应检查转头安装是否牢固，机腔中有无异物掉入。 （3 ）样品应预先平衡，使用离心筒离心时离心筒与样品应同时平衡。 （4 ）挥发性或腐蚀性液体离心时，应使用带盖的离心管