性病实验室检测方法.pptxVIP

性病实验室诊断技术 性病是一组主要通过性接触而传播的一种传染性疾病。 包括细菌、真菌、病毒、衣原体、支原体、螺旋体、原虫和寄生虫等 性病实验室诊断 为临床正确诊断提供科学依据性传播疾病(STD)/性传播感染(STI)病原体淋球菌梅毒螺旋体生殖器疱疹病毒生殖道沙眼衣原体乳头瘤病毒HIV病毒杜克雷噬血杆菌衣原体念珠菌滴虫疥虫阴虱肝炎病毒－－－病 种淋病梅毒:生殖器疱疹:生殖道沙眼衣原体感染:尖锐湿疣:HIV感染/艾滋病:软下疳:性病性淋巴肉芽肿:念珠菌性阴道炎:滴虫性阴道病:疥疮:阴虱病:肝炎（乙、丙）：－－－ 主要常见性病实验室检测介绍梅毒淋病常用梅毒检测方法病原学检测血清学检测病原学检查原理：一期、二期梅毒时，取硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损部位组织液或淋巴结穿刺术得到的组织液，在暗视野显微镜下，光线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光，从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。方法：病原学检查的主要方法有暗视野显微镜检查、镀银染色法和直接荧光法暗视野显微镜检查标本采集部位：一期或二期梅毒的皮肤或粘膜损害 有痂者去痂，先用无菌棉球或纱布蘸生理盐水，将皮损拭净，轻压皮损至渗液（避免出血）。然后用载玻片印取渗液，立即检查，未破溃者用手术刀刮破皮疹，取渗出液。淋巴结穿刺液 以无菌操作法用注射器吸取0.3-0.5ml生理盐水，穿刺入淋巴结，再回吸数次，最后将吸取液涂玻片上，立即检查。暗视野显微镜检查制片标本置于载玻片上，加一滴生理盐水，盖上盖玻片，在暗室中于暗视野显微镜上油镜观察观察先用低倍镜，再转至高倍镜梅毒螺旋体在暗背景上呈白色发光，螺旋整齐，运动规律（旋转、伸缩或蛇行运动）梅毒血清学检测方法非特异性类脂体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒实验室操作要求梅毒血清学试验操作和结果分析⑴标本的采集和分离①编号或姓名登记②采血、分离血清和贮存梅毒实验室操作要求⑵试剂准备①温度、器具的校正②试剂、血清和反应板恢复到试验温度③试剂鉴定梅毒实验室操作要求⑶试验操作①血清量的控制②试剂量的控制③旋转仪速度和时间的控制非梅毒螺旋体抗原血清试验1、原理： 梅毒螺旋体感染人体后，宿主会产生抗类脂抗原的抗体，可检测梅毒患者血中的抗类脂抗原的抗体 2、方法： 快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR) 甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）RPR定性试验?在纸卡圆圈中加入50μL待检血清，涂满整个圆圈?使用滴管和专用针头（60滴/mL），加1滴抗原悬液?旋转100rpm8min?立即判断结果RPR定量试验?待检血清用生理盐水在纸卡圆圈中作6个稀释度：原血清，1:2，1:4，1:8，1:16，1:32?按定性试验步骤操作，以出现阳性反应的最高稀释度报告结果RPR定量试验中等至大的凝块为阳性（圈4和7）有明确但很小的凝块为弱阳性（圈2和3）颗粒均匀分布（圈1,5,8-10）或稍粗糙（圈6）为阴性非梅毒螺旋体抗原血清试验的优缺点：优点： *敏感性特异性好 *不需要昂贵设备，简单易行 *适用于大量人群的血清筛查 *有效治疗后血清滴度可下降并阴转，故可作疗效观察、判愈、复发。 *20分钟可获得实验结果。 *试剂与方法均已标化，各实验室间结果可比较。 *试验可被内部质控和外部质控监控进行。缺点： *敏感性和特异性低于螺旋体抗原试验，BFP反应和前带现象 非特异性血清试验的假阴性：1）有25%~40%的未治梅毒在晚期隐性期可自然逆转为阴性，约30%的心血管和神经梅毒呈阴性。2）前带现象（the prozonphenomenon）, 即为抗原抗体量比例不适，抑制阳性反应。一般易发生在滴度在1：500以上的标本中。 1%的II期梅毒会出现前带现象。3）操作人员应注意实验的温度，试剂盒从冰箱取出后应恢复至室温，室温过低（〈10℃）可能出现假阴性或结果不准确。 非特异性血清试验生物学假阳性 0.25%~0.86%阳性标本为生物学假阳性，主要出现在自身免疫疾病的患者如内风湿性关节炎、其它病原体感染（病毒性肺炎、恶性肿瘤和麻风）、妊娠妇女。 应排除技术性、生理性和生物学假阳性，并用特异性试验来证实。非梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义非梅毒螺旋体抗原血清试验方法简单、快速、敏感性和特异性较好。适用于大量人群的筛查。早期梅毒硬下疳出现1周-2周后，血清可呈阳性。经治疗后血清滴度可下降并阴性，故可作为疗效观察、判愈、复发或再感染的指征。梅毒螺旋体抗原血清试验1、原理：用梅毒螺旋体特异蛋白为抗原，检测梅毒患者血中 特异性抗梅毒螺旋体抗原的抗体 2、方法： 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 (TPPA) 梅毒螺旋体血球凝集试验 (TPHA) 梅毒酶联免疫吸附试验（ELISA） 梅毒免疫层析法-梅毒快速检测 (RT) 荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS） 化学发光免疫分析法（