第15章蛋白质的生物合成翻译.pptx

Protein Biosynthesis，Translation ;本章主要内容;重点和难点： 原核生物蛋白质合成的过程 原核生物与真核生物蛋白质合成的区别;1 蛋白质的翻译系统;原料:20种氨基酸 mRNA: 合成蛋白质的模板。 tRNA: 原料氨基酸的“搬运工”。 rRNA: 与多种蛋白质结合成核糖体，为 合成多肽链的装配机。; mRNA是遗传信息的载体（载有遗传密 码），是合成蛋白质的模板，它以一系列三 联体密码子的形式从DNA转录了遗传信息。 每个密码子代表一个氨基酸。; 遗传密码（genetic code）：核酸中的核苷酸碱基序列与蛋白质中的氨基酸序列之间的对应关系。 三个碱基编码一个氨基酸，三联碱基称为一个密码子（codon）。; 1961年，M. Nirenberg等用放射性同位素标记的方法对密码子的组成进行了推测，证明mRNA中核苷酸的排列顺序与蛋白质中氨基酸之间的对应关系，是以每三个核苷酸代表一个氨基酸，又称三联体密码。 至1966年，20中氨基酸对应的61个密码子和三个终止密码子全部被破译。; 由AUG开始，每3个核苷酸为一组，决 定肽链上某一个氨基酸或蛋白质合成的起始、 终止信号。 起始密码（initiation coden）:AUG 终止密码（termination coden）: UAA，UAG，UGA ;遗传密码表;从mRNA5’端起始密码子AUG到3’端终止密码子之间的核苷酸序列，各个三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链，称为开放阅读框架(open reading frame, ORF)。 ;② 简并性（同一氨基酸有多个不同密码 子， 除Trp，Met外）同义密码 ③ 通用性（共同使用同一套密码子） ④ 不重叠性（三联体，连续性，无逗点， 连续阅读，5’ 到3’） ⑤ 兼职性（终止密码 编码氨基酸的密码） ⑥ 例外（支原体，UGA编码Trp；纤毛 虫，UAA和UAG编码Glu）; 原核tRNA有30-40种，真核有50-60种，含70- 90个核苷酸， 并有多种稀有碱基。 tRNA是最小的RNA， 占细胞总RNA 的15% 左右，其功能是搬运氨基酸和解读密码子。 tRNA 具有“四环一臂”和“三叶草” 形的典型 结构。;tRNA的结构－“四环一臂” 倒L形的三级结构 ;密码子与反密码子的配对方式;1.4 核糖体的结构和功能（ribosome）;;;核糖体的组成; 蛋白质合成中，核糖体首先与mRNA结合，按5’到3’方向移动，每次移动的距离相当于一个密码子。;A位：氨酰基tRNA位 (aminoacyl tRNA site);①P位：即肽位(Peptidyl site)，3’端连接肽链的肽 酰tRNA占据的位置。 ②A位：即氨基酰位(Aaminoacyl site)，氨基酰 tRNA就加入到A位上， ③E位：tRNA释放结合位点(Exit site);（4）多核糖体; 每个核糖体可独立完成一条肽链的合 成，所以在多核糖体上可以同时进行多条 肽链的合成，提高了翻译的效率。;2. 原核生物蛋白质合成过程;氨基酸 + tRNA;第一步反应;第二步反应;① 氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和 tRNA都有高度特异性。 ② 催化氨基酰-tRNA脱酰基,具有校正活性。;（3）密码子-反密码子的相互作用; 摆动学说：密码子的头两个碱基严格遵守碱基配对规律为tRNA的反密码子识别，他们中的任何不同即为不同tRNA识别，但第三个碱基不这样，有一定的自由度，即摇摆性。;密码子、反密码子配对的摆动现象;（4）翻译的起始; 在起始密码子AUG上游9-13个核苷酸 处，有一段可与核糖体结合、富含嘌呤的 3-9个核苷酸的共同序列，一般为AGGAG GU，此序列称SD序列。 使得结合于小亚基上的起始tRNA能 正确地定位于mRNA的起始密码子AUG。;shine-Dalgarno顺序;③ 70s起始复合物的形成;IF-3; 第二步: 30S复合物的形成;IF-3;IF-3;IF-3;;;(5) 肽链延长;原核延长因子; 又称注册(re