一次性使用卫生用品杀菌性能、抑菌性能与稳定性检测方法.pdfVIP

一次性使用卫生用品杀菌性能、抑菌性能与稳定性检测方法 D.1 样品采集 于同一批号3个运输包装中至少抽取6件最小销售包装样品（若样品数量不能满足实验所需，则应相 应增加采样数量），其中1/3样品用于抑菌、抗菌或杀菌性能测试，2/3样品用于留样；如需做稳定性测 试，样品数量再作相应增加。 D.2 试验方法选择原则 D.2.1 卫生湿巾选择杀菌性能试验。 D.2.2 液体抗菌剂选择杀菌性能试验，含有可溶性抗菌成分的纺织品选择浸渍抗菌试验。含有不可溶 抗菌成分的纺织品、无纺布、纤维等，经鉴别不含可溶性抗菌成分后，采用烧瓶振荡试验。 D.2.3 液体抑菌剂选择抑菌性能试验，湿巾类或其他自身含有抑菌成分的产品选择载体抑菌试验，含 有溶出性抑菌成分的产品选择抑菌环试验，含有可溶性抑菌成分的纺织品选择浸渍抑菌试验，含高吸水 材料的产品选择高吸水材料抑菌性能试验。 D.3 试验材料 D.3.1 试验菌 D.3.1.1 试验菌种类 细菌：大肠杆菌(8099或CICC 10899）或大肠杆菌（ATCC 25922）， 金黄色葡萄球菌(ATCC 6538 或 ATCC 25923)； 真菌：白色念珠菌(ATCC 10231)； 根据产品特定用途所需用的其他菌株。 D.3.1.2 试验菌悬液制备 取冷冻条件下保存的菌种（冻干管、甘油管或磁珠），在无菌操作下打开，加入适量营养肉汤，轻 柔吹吸数次，使菌种融化分散。取含5.0 mL～10.0mL营养肉汤培养基试管，滴入少许菌种悬液，36 ℃ ±1 ℃培养18 h～24 h。用接种环取第1代培养的菌悬液，划线接种于营养琼脂培养基平皿上，36 ℃± 1 ℃培养18h～24 h。挑取上述第2代培养物中典型菌落，接种于营养琼脂斜面，36 ℃±1 ℃培养18h～ 24 h即为第3代培养物。取菌株第3代～6代的营养琼脂培养基（真菌为沙堡弱琼脂培养基）新鲜斜面培 养物（18 h～24 h），用5.0 mL 0.03 mol/L磷酸盐缓冲液（简称PBS）洗下菌苔，使菌悬浮均匀后用PBS 稀释至所需浓度（浸渍抑菌实验使用肉汤对培养液进行稀释）。 D.3.2 试验器材 D.3.2.1 培养基：细菌培养用营养琼脂培养基，真菌培养用沙堡弱琼脂培养基；营养肉汤培养基，沙 堡弱液体培养基。 D.3.2.2 稀释液：0.03 mol/L PBS，pH 7.2。 D.3.2.3 中和剂（PBS配制）。 D.3.2.4 载体：32支纱/cm×32支纱/cm脱脂白平纹布片（长×宽=20 mm×30 mm），经压力蒸汽灭菌烤 干后使用。 D.3.2.5 计时器。 D.3.2.6 电子天平。 D.3.2.7 振荡摇床。 D.3.2.8 2 000 r/min涡旋震荡器。 D.3.2.9 恒温水浴箱。 D.3.2.10 36 ℃培养箱。 D.3.2.11 37 ℃、35 ℃～40 ℃、40 ℃～45 ℃和54 ℃恒温箱。 D.3.2.12 Ⅱ级生物安全柜。 D.4 卫生湿巾杀菌性能试验 D.4.1 适用范围 适用于添加有杀菌成分的卫生湿巾或可溶性抗菌物质的载体类产品的抗菌性能效果的鉴定。 D.4.2 中和剂鉴定试验 D.4.2.1 试验菌种： 根据产品杀灭微生物类别，选择对其敏感度较高的细菌，如宣称对真菌有杀灭作用，需增加白色念 珠菌；当用其他特定微生物进行杀菌试验时，应以该特定微生物进行中和剂鉴定试验。 D.4.2.2 中和剂试验分组： 第1组：5.0 mL中和剂+染菌对照片； 第2组：（样片+5.0 mL中和剂）+染菌对照片； 第3组：5.0 mL PBS+染菌对照片； 第4组：同批次PBS 0.5 mL＋中和剂0.5 mL＋培养基。 D.4.2.3 中和剂试验评价规定如下： 4 4 a) 第 1 组、第 2 组和第 3 组有相似量试验菌生长，并在 1.0×10 CFU/片～5.0×10 CFU/片之间， 其组间菌落数误差率应不超过 15％； b) 第 4 组无菌生长； c) 连续 3 次试验均符合以上要求判定为合格。 D.4.3 试验步骤 对照样片应与试验样片同等材质、同等大小但不含杀菌成分，且经灭菌处理；将100 μL试验菌悬