生物技术药物制造进程.pptVIP

;第一节生物技术药物生产简介; 获得目的的基因 ↓ 构建重组体 ↓ 构建基因工程菌(或工程细胞) ↓ 大规模培养工程菌 ↓ 产物分离纯化 ↓ 除菌过滤 ↓ 半成品检定 ↓ 制剂 ↓ 成品检定 ↓ 包装 生物技术药物生产一般过程;1、获得具有遗传信息的目的基因 从复杂的生物体基因组中采用不同方法分离并获得带有目的基因的DNA片段。获得目的基因主要通过下述方法。 (1)用限制性内切酶法直接分离目的基因 质粒和病毒等DNA分子小的几kb,大的几百kb,编码的基因较少,直接用限制性内切酶法获得目的基因 （2）人工合成目的基因 人工合成目的基因主要采用下列3种途径。 ①酶促方法 经提取获得编码基因的信息RNA（mRNA），在逆转录酶的作用下，合成互补DNA（cDNA）链，在DNA聚合酶I的作用下，加工成为双链DNA分子。 ②化学合成法 前提是必须已知基因的核苷酸序列，化学合成的DNA片段一般较短，需要用DNA连接酶进行连接，从而获得较长的DNA片段。 ③聚合酶链反应（PCR） 先决条件是必须已知基因的核苷酸序列，根据序列设计引物，进行PCR扩增获得的目的基因。也可以采用反转录PCR（RT-PCR）等方法，直接从富含目的基因的实验材料提取RNA，在逆转录酶的作用下获得cDNA，以此为模板进行PCR扩增获得目的基因。 (3) 构建基因组文库从cDNA文库分离目的基因 ;;4、鉴定带有目