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蛋白质离子交换层析技术;蛋白质离子交换层析技术;1.离子交换层析的原理;;2.离子交换剂;2.1离子交换剂的基本结构;2.2离子交换剂的指标;2.3离子交换剂的分类;2.3离子交换剂的分类;2.3离子交换剂的分类;2.3离子交换剂的分类;2.3离子交换剂的分类;2.3离子交换剂的分类;;2.3离子交换剂的分类;3.实验条件的确定;3.1离子交换剂;3.2色谱柱;3.3缓冲液;4.离子交换的操作方法;4.1预处理;4.2装柱、平衡;4.3上样、洗涤;4.4洗脱;4.4洗脱;4.5色谱柱的再生与清洗;5.常见问题及处理;增加柱压并轻敲柱壁的方法以除去气泡,确保在引入任何溶液时不要产生气泡
样品蛋白质损失量允许的情况下,支撑物应取出并清洗
用高径比较小的柱子
过柱前的样品要超声或超滤处理;
降低初始上样缓冲液离子强度
注意计算蛋白质的等电点
树脂应充分平衡或用严格的再生方法
;树脂上的蛋白质未洗净
pH值不合适或蛋白质发生沉淀
水解酶破坏了目的蛋白或树脂中有微生物滋生
;5.4蛋白质分辨效果差;6.应用实例;6.1混合物的分离;6.1混合物的分离;6.1混合物的分离;6.2包涵体蛋白的柱上复性
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