选修课-流式细胞术(李婉明）.pptVIP

流 式 细 胞 术 细胞生物学教研室 李婉明 流式细胞术（Flow Cytometry, FCM）： 是对悬液中的单细胞或其他生物粒子，通过检测标记的荧光信号，实现高速、逐一的细胞定量分析和分选的技术。 可测量细胞大小、内部颗粒的性状，还可检测细胞表面和细胞浆抗原、细胞内DNA、RNA含量等，可对群体细胞在单细胞水平上进行分析，在短时间内检测分析大量细胞，并收集、储存和处理数据，进行多参数定量分析；能够分类收集(分选)某一亚群细胞，分选纯度95%。在血液学、免疫学、肿瘤学、药物学、分子生物学等学科广泛应用。 三个步骤： 第一，是仪器前阶段，包括试剂的准备，细胞制备、 细胞的荧光染色；（上午实验部分） 第二，是流式细胞仪阶段，主要是仪器的操作； 第三，是结果分析阶段。 实验一 流式细胞术检测5-FU对大肠癌细胞 HCT116的细胞周期抑制作用 实验二 流式细胞术检测CD44在大肠癌细胞 HCT116的表达情况 实验一 流式细胞术检测5-FU对大肠癌细胞 HCT116的细胞周期抑制作用 【实验目的】 1. 掌握PI单染进行细胞周期检测的操作步骤 2. 熟悉5-FU对大肠癌细胞的抑制机理 3. 熟悉流式细胞术细胞周期检测的结果分析 4. 了解流式细胞仪的操作原理 【实验用品】 (1) 大肠癌细胞HCT116 (2) 锡箔纸、离