PCR实验室管理制度.docxVIP

精品文档 精品文档 PAGE PAGE #欢迎下载 PCR实验室管理制度 1.0 目的 建立PC戏验室的工作规范，确保分子诊断室正常工作。 2.0 范围 PCR实验室，包括试剂准备间、标本制备间、扩增间的使用及管理。 3.0 职责 PCR实验室的工作人员必须遵守本文件的规定。 4.0 内容 在进入实验室前，在隔离台戴好头套口罩，穿上鞋套与实验服。 试剂准备间 配电房先打开风机（先开送风机，再开排风机），再把空调系统打开。关闭时的顺序相反。 其它室的用品不得带入本室。 从PC戏验室1号入口门进入实验室，到达试剂准备间的缓冲间，脱下白色工作服，挂在缓冲 间的左侧，在缓冲间的右侧更换试剂准备间的专用工作服（蓝色），进入试剂准备间，实验中 须戴一次性手套，手套常更换。 打开已灭菌的超净台，通风一段时间，排走臭氧。取出当次实验需配制和使用的试剂，其余试 剂要立即收好放回冰箱内。 操作应在冰上进行。Taq酶尽量在配液的最后一步加入。应减少 dNTP反复冻融的次数。每次实 验后将枪调至最大量程。加模板前打开废液缸盖，加完模板后务必盖上废液缸的盖子。 实验作业完成时，应及时清理工作台，做好实验登记，应使用本室专用的记录本和笔，打开超 净台的紫外次T旋钮到 20分钟处。使用过的离心管、吸头须置于 3%勺HCl溶液中浸泡、消毒后方 可弃之。 打开传递窗门，垫上一次性手套，将配好的试剂放到传递窗里，关上传递窗门。 在试剂缓冲间脱下工作服，穿上白色工作服。 标本制备间 在标本制备间的缓冲间，脱下白色工作服，换上标本制备间专用的工作服（粉红色），进入标 本制备同。 打开传递窗的门，取出配好的试剂，使用本区专用的加样器和带滤芯枪头。 实验作业完成时，应及时清理工作台，使用过的离心管、带滤芯枪头须置于 3%勺HCl溶液中浸 泡、消毒后方可弃之。 做好实验登记，应使用本室专用的记录本和笔，打开超净台的紫外灯旋钮到 20分钟处。 精品文档 精品文档 打开传递窗门，垫上一次性手套，将配好的试剂放到传递窗里，关上传递窗门。 提取基因组模板，提取过程中丢弃的枪头、离心管和废液请丢弃在此垃圾袋并于实验结束后立 即将垃圾袋扎口丢弃。提取质粒可先提取野生型质粒再提取突变型质粒。每次提取工作完成后 擦拭台面。 在试剂缓冲间脱下工作服，穿上白色工作服。 扩增间 在扩增间的缓冲间，脱下白色工作服，换上扩增间专用工作服（绿色）。 打开传递窗门，取出配好的试剂，关上传递窗门。 打开 PCRa预热 20min。 将反应管放入PCR＜中，关好门。 脱掉手套，设定程序，并命名。 结束后需待仪器冷却后方可取出 PC敬里的试剂，取出时用镣子将试剂条夹出，注意勿要使管 盖打开，用三个 PE手套包好方可弃之。机器上不允许存放 PCRT增产物，每次实验后请自行及 时清理PCRT增产物。 结束实验后，到配电房先把空调系统关掉，再关掉排风机，之后关掉送风机。 文件的处理：当天所做的实验结果，当天拷到部门电脑上处理，复制一份将文件名改为记录本 上的命名。可将13t验结果导到 PPT上，并标记。 传递窗的使用 传递窗每天早上灭菌 20分钟一次。当天使用可不用再次灭菌。将试剂放到传递窗时，在底下垫 上一层手套。 压力监控 每天早上空调运行半小时后，记录各 PCR实验室的压力差：试剂准备间： 5?10;标本制备间: -5?-10;扩增间：V -10。各缓冲间白压力为+5. 超净台的摆放 精品文档 精品文档 PAGE PAGE # 欢迎下载 。 实验室卫生管理 禁止非工作人员进入实验室；参观实验室等特殊情况须在实验室管理员协助下进行。 实验室内各工作人员应有个人防护意识，进入实验室时应更换工作服和鞋子，穿着整洁，不留长 指甲，不佩戴首饰，长发应束于脑后；禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食 物；禁止将个人物品带入实验室；实验室内应避免手 -口，手-眼，手-鼻接触，以防止间接感 染。 实验结束后仍需保留使用的物质，应移入具塞的容器中，并做好标识标签，并写清楚名称、浓度、 配制日期、储存温度、有效期和配制人，并放置于相应保存条件下；勿置室温过夜。 每天配制使用浓度的消毒液，放于固定地点，用于污染时消毒用，应定期更换消毒液品种。 每天上班 8 点 45 分先关实验室紫外灯，然后开启风扇，打开实验室走廊窗户。每天 9 点前每间 负责人填写冰箱温湿度记录表。 下午 4点 45分每间负责人填写实验室及冰箱温湿度记录表，清理实验室卫生，检查实验室垃圾 及废液缸枪尖，生物垃圾放置于生物安全垃圾桶内，通知专门的垃圾转运车进行清除。在生物 安全垃圾桶周边喷洒 84 消毒液（按 1:9 或者 1:10 比例配制）。 每日卫生打扫完后，在实验室内喷洒 84 消毒液，喷洒完，待 20分钟过后，对实验室仪