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- 2021-08-13 发布于河北
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ELISA 知识简介1. ELISA的原理2. ELISA的类型3. 试剂准备:免疫吸附剂 结合物 酶底物的准备 4. 对照设定5. 标本的采取和保存6. 结果判断 1. ELISA的原理 ELISA是一种免疫测定(immunoassay,IA) 。基础:抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,由此进行定性或定量分析。酶免疫测定类型 酶免疫组化酶免疫技术均相酶免疫测定酶免疫测定固相酶免疫测定非均相酶免疫测定液相酶免疫测定这种固相酶免疫测定方法在1971年最初建立时称为酶联免疫吸附剂测定(Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay),简称ELISA。1.1 抗原抗体反应 1.1.1 可逆性 抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡,其反应式为:Ag+Ab→Ag·Ab 抗体的亲和力(affinity),可以用平衡常数K表示:K=[Ag·Ab]/[Ag][Ab] ,Ag·Ab的解离程度与K值有关。高亲和力抗体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合,两者结合牢固,不易解离。解离后的抗原或抗体均能保持原有的结构和活性。1.1.2 特异性 抗原抗体的结合发生在抗原的决定簇与抗体的结合位点之间。化学结构和空间构型互补关系,具有高度的特异性。 测定某一特定的物质,
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