7基因芯片数据分析.pptxVIP

第七章 基因芯片数据分析;　第一节 芯片平台及数据库 (General Microarray Platform and Database );　寡核苷酸芯片类似于cDNA芯片，但是在探针的设计上优于cDNA芯片，它的探针并不是来源于cDNA克隆，而是预先设计并合成的代表每个基因特异片段的约50mer左右长度的序列，然后将其点样到特定的基质上制备成芯片，从而克服了探针序列太长导致的非特异性交叉杂交和由于探针杂交条件变化巨大导致的数据结果的不可靠。 ;五、基因表达仓库 Gene Expression Omnibus，GEO 六、斯坦福微阵列数据库 The Stanford Microarray　 Database，SMD ;第二节 基因芯片数据预处理(General Microarray Data Type and Database );(二) Affymetrix公司的原位合成芯片;数据过滤;二、数据补缺;(二)数据补缺方法;2、K近邻法;3、回归法 ;三、数据标准化;(二)运用哪些基因进行标准化处理 芯片上大部分基因(假设芯片上大部分基因在不同条件下表达量相同) 不同条件间稳定表达的基因(如持家基因) 控制序列(spiked control ) 合成DNA序列或外源的DNA序列，在不同条件下表达水平相同。;1、片内标化(Within-slide normalization) (1) 全局标化(Global normalization); (2) 荧光强度依赖的标化(Intensity dependent normalization); (3) 点样针依赖的标化(Within-print-tip-group normalization) ;(4) 尺度调整(Scale adjustment) 为什么 调整不同栅格(grids)间的数据离散度 方法：计算不同栅格的尺度因子 ;2、片间标化(Multiple-slide normalization) 线性标化法(Linear scaling methods) 与芯片内标化的尺度调整(Scale adjustment) 方法类似 非线性标化法(non-linear methods) 分位数标化法(Quantile normalization) 两张芯片的表达数据的分位数标化至相同，即分布于对角线上。 ;3、染色互换实验(dye-swap experiment ) 的标化 实验组 对照组 芯片1 cy5(R) cy3(G’) 芯片2 cy3(G) cy5(R’) 前提假设：c︽c’ 方法: ; 1、 提取定性信号 (1)对每个探针对计算R R = (PM - MM) / (PM + MM) (2)比较R与定义的阈值Tau(小的正值，默认值为0.015 ). (3) 单侧的Wilcoxon’s Signed Rank test产生p值，根据p值定义定量信号值 Present call Marginal call Absent call ;2、提取定量信号 (1)分析步骤 获取探针水平数据 背景值效正 标准化处理 探针特异背景值效正 探针集信号的汇总;;; ;;;;;;;;第三节 差异表达分析(Analysis of Differentially Expression Gene );二、统计学方法 ;2、方差分析 ;三、SAM (Significance Analysis of Microarrays);(二) 分析步骤 计算统计量 扰动实验条件，计算扰动后的基因表达的相对差异统计量 计算扰动后的平均相对差异统计量 ; 确定差异表达基因阈值：以最小 的正值和最大的负值作为统计阈 值，运用该阈值，统计在值中超 过该阈值的假阳性基因个数，估 计假阳性发现率FDR值。 通过调整FDR值的大小得到差异 表达基因。;四、信息熵;第四节 基因芯片数据的聚类分析(Cluster Analysis of Microarray Data) ;（二）层次聚类;在对含非单独对象的类进行合并或分裂时，常用的类间度量方法;(三)k均值聚类;(四)自组织映射聚类;第五节 基因芯片数据的分类分析(Classification of Microarray Data );二、k近邻分类法 ;三、决策树;(二)分析步骤：提取分类规则，进行分类预测 在构造决策树的过程中最重要的一点是在每一个分裂节点