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2021年生理实验报告神经干复合动作电位
2021年生理实验报告神经干复合动作电位
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2021年生理实验报告神经干复合动作电位
人体解剖及动物生理学试验汇报
实 验 名 称
神经干复合动作电位
姓名
学号
系别
组别
同组姓名
试验室温度
20℃
试验日期
4月24日
试验题目
蟾蜍坐骨神经干复合动作电位(CAP)
A蟾蜍坐骨神经干CAP阈值和最大幅度确定
B蟾蜍坐骨神经干CAP传导速度确定
C蟾蜍坐骨神经干CAP不应期确定
试验目
确定蟾蜍坐骨神经干复合动作电位(CAP)
(1)临界值和最大值
(2)传导速度
(3)不应期(相对不应期、 绝对不应期)
三、 试验原理
神经系统对维持机体稳态起着关键作用, 动作电位(AP)是神经系统进行通信联络所采取信号, 多个神经元轴突集结成束形成神经, APs沿感觉神经有外周传向中枢或沿运动神经由中枢传向外周。坐骨神经干由上百根感觉神经和运动神经组成, 分别联络腿部感受器和效应器(骨骼肌)。假如电刺激一根离体坐骨神经干, 经过细胞外引导方法, 就能统计到神经干复合动作电位(CAP)。一个CAP是一系列含有不一样兴奋性神经纤维产生多个AP总和。刺激强度越爱, 兴奋神经纤维数目就越多, CAP幅度也就越大。与胞内引导得到单细胞AP相比, CAP是双相电位, 逐层递增(非全或无), 而且幅度较小。
阈电位是指一个刚刚能观察到CAP, 所对应刺激为阈刺激。在一定范围内增加刺激强度, CAP幅度对应增大。最大CAP所对应最小刺激电位即最大刺激。
动作电位能够沿神经以一定速度不衰减地传导, 传导速度快慢基于多个原因, 这些原因决定了生物体对其坏境适应性。它们包含神经直径、 有没有髓鞘、 温度等等。
神经在一次兴奋过程中, 其兴奋性将发生一个周期性改变, 最终恢复正常。兴奋周期性改变, 依次包含绝对不应期、 相对不应期等等。绝对不应期内, 不管多么强大刺激都不能引发神经再一次兴奋; 相对不应期内, 神经兴奋性较低, 较大刺激能够引发兴奋。绝对不应期决定了神经发放冲动(动作电位)最高频率, 确保了动作电位不能叠加(区分于局部电位), 以及单向传导(只能有受刺激部位向远端传导, 不能返回)特征。不应期产生依靠于细胞膜上特定离子通道特点, 如钠、 钾离子通道。
四、 试验方法
蟾蜍坐骨神经标本制作
双毁髓处死蟾蜍后, 剥去皮肤, 暴露腰骶丛神经, 游离大腿肌肉之间坐骨神经干及其下行到小腿两个分支: 胫神经和腓神经, 三段结扎, 剪去无关分支后离体。注意保持神经湿润。
2. 将神经搭于标本盒内, 确保神经与电极充足接触, 中枢端接触刺激电极S1和S2, 外周端接触统计电极R1-R2, 之间接触接地电极。
3. 刺激输出线两夹子分别连接标本盒刺激电极S1和S2, 插头接生物信号采集系统RM6240刺激输出插口; 信号输入倒显得红色和绿色夹子分别连接统计电极(绿色夹子在前, 引导出正向波形, 即出现第一个波峰向上), 黑色夹子连接接地电极, 插头接通道1.
蟾蜍坐骨神经干复合动作电位(CAP)临界和最大幅度确定
打开信号采集软件, 从“试验”菜单中选择“神经干动作电位”, 出现自动设置界面, 各项参数已设置好, 界面中只有一个采集通道, 对应仪器面板上通道1(所以信号输入线应连接在通道1)。
确定装置是否正常工作, 以及神经是否含有活性。采取较大刺激强度, 1V, 刺激时程0.2ms, 延时5ms, 刺激模式为但刺激。选择“同时触发”, 按下“开始刺激”后, 正常情况下屏幕上会出现一个双相电位即CAP。
快速降低刺激强度, 确定CAP阈电位。统计刺激阈值及CAP幅度(波峰与波谷之间差值)。
以0.05V或更小间隔, 逐步增大刺激强度, 观察CAP幅度改变, 同时, 统计刺激电位及对应CAP幅度, 直到CAP达成稳定, 即最大值(神经标本在正常生理活性时, 1V以内刺激强度即可引发最大CAP)。
蟾蜍坐骨神经干复合动作电位(CAP)传导速度确定
从“试验”菜单中选择“动作电位传导速度”, 界面出现两个采集通道, 对应通道1和通道2, 所以采取两对引导电极R1-R2和R3-R4, 同时输入两道信号。
使用单刺激模式, 调整刺激强度, 使产生最大CAP。
测量两个通道显示动作电位起点时间差。
测量R1和R3之间神经长度。
反复步骤1-4最少三次。
计算传导速度: 传导速度=△D(mm)/△T(ms)
计算几次反复测量得到传导速度平均值(Mean)和标准误(SEM)。
蟾蜍坐骨神经干复合动作电位(CAP)不应期确定
采取双刺激模式, 刺激条件相同, 产生一对幅度相同最大CAP。
逐步减小两刺激间隔, 直到第二个CAP幅度刚刚开始减小, 即进入相对不应期。此波间隔与绝对不应期之差
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