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放射自显影放射自显影autoradiography放射自显影的原理是利用
放射自显影放射自显影autoradiography放射自显影的原理是利用
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放射自显影放射自显影autoradiography放射自显影的原理是利用
放射自显影
放射自显影 (autoradiography)
放射自显影的原理是利用放射性同位素所发射出来的带电离子 ( α或 β粒子 )作用于感光资料的
卤化银晶体,进而产生潜影,这类潜影可用显影液显示,成为可见的 " 像 ",所以,它是利用卤化银
乳胶显像检查和丈量放射性的一种方法。
放射性核素的原子不停衰变,当衰变掉一半时所需要的时间称为半衰期。各样放射性核素的半
衰期长短不一样 (表 ),在自显影实验中多项选择用半衰期较长辈。关于半衰期较短的核素,应采用较快的
样品制备方法,所用剂量也应加大。
表 自显影实验中常用核素的半衰期与能量
名称
半寿期
粒子种类
能量 (MeV)
名称 半寿期
粒子种类
能量 (MeV)
3H
12.3
yr
β 0.018
45Ca
152
d
β 0.26
11C
20 min
β 0.981
59Fe
45
d
β 0.46
14C
5700
yr β 0.155
γ 1.30
32P
14.3
d
β 1.71
60Co
5.3
yr
β 0.308
35S
87.2
d
β 0.167
64Cu
12.8
hr β 0.657
131I
8.0
d
β 0.25
γ 1.35
放射自显影技术
放射自显影技术是利用放射性同位素的电离辐射对乳胶(含 AgBr 或 AgCl )的感光作用,对细
胞内生物大分子进行定性、定位与半定量研究的一种细胞化学技术。放射自显影术( radioautogra
phy ;autoradiography )用于研究标志化合物在机体、组织和细胞中的散布、定位、排出以及合成、
更新、作用机理、作用部位等等。其原理是将放射性同位素(如 14C 和 3H )标志的化合物导入生
物体内,经过一段时间后,将标本制成切片或涂片,涂上卤化银乳胶,经一准时间的放射性曝光,
组织中的放射性即可使乳胶感光。而后经过显影、定影办理显示复原的黑色银颗粒,即可得悉标本
中标志物的正确地点和数目,放射自显影的切片还可再用染料染色,这样即可在显微镜下对标志上
放射性的化合物进行定位或相对定量测定。
这类技术与电镜样品办理,则为电镜放射自显影。
由
于有机大分子均含有碳、氢原子,故实验室一般常采用
14C
和
3H
标志。
14C
和
3H
均为弱放射性
同位素,半衰期长,
14C
为
5730
年, 3H
为
12.5
年。一般常用
3H
胸腺嘧啶脱氧核苷(
3H-TDR
)
来显示
DNA ,用
3H
尿嘧啶核苷(
3H-UDR
)显示
RNA ;用
3H
氨基酸研究蛋白质,研究多糖则用
3H 甘露糖、 3H 岩藻糖等。
放射自显影法
autoradiography 放射自显影法。是使用照相乾板或乳剂来察看生物体内放射性物质的摄入,
借以丈量生物体内物质的散布、转移、代谢的细胞化学和组织化学的方法。即摄入了特定的放射性
物质的压展标本和切片标本或活体在暗室中与照相乳剂密切接触搁置。在由生物体内摄入的放射性
物质发出的射线而感光的部位上,经过显影,黑色呈像的银粒子就显示出来了。依据观察水平的不
同可分为宏观放射自显影法(可见放射自显影法)、显微放射自显影法(光学显微镜显示的放射自
显影法)、超微放射自显影法(电镜显示的放射自显影法)。宏观放射自显影法除用于组织切片内
物质散布的检查外,也与纸层析法和电泳法一同用于微量物质的测定。所用的放射性核素,宏观放
射自显影法有 131I 、 32P 、 35S 、 90Sr 、59Fe 、 45Ca 、 14C ;而显微和超微放射自显影法主假如使
用 14C 和 3H 。
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