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A280紫外光吸收法测定蛋白浓度 A280紫外光吸收法测定蛋白浓度 PAGE / NUMPAGES A280紫外光吸收法测定蛋白浓度 A280(nm) 紫外光汲取法测定蛋白浓度 原理： 蛋白质分子中常含有酪氨酸、 色氨酸、 苯丙氨酸等苯环构造，在紫外 280nm波优点有 最大汲取峰， 其光汲取值与蛋白质浓度成正比， 故能够用 280nm波长汲取值大小来测定蛋白 质含量。 优点： 1. 迅速； 2. 对蛋白质无损坏性。 弊端： 1. 不是严格的定量方法。由于此法是依据 酪氨酸（ Tyr ）、苯丙氨酸（ Phe）、色氨酸（ Trp ）残基的强汲取值来测定的，不一样的蛋白质 拥有不一样的消光系数。 此外，当蛋白质分子中不含 Tyr 、Phe 或 Trp 残基时，该方法就不可以 检出蛋白（此法用于测粗提总蛋白浓度较为适合） ，此外核酸可惹起激烈扰乱。 敏捷度： mg/ml ~ 2 mg/ml ；比色杯最小丈量体积为 ml 。 注意事项： 1. 实验室往常以为用 1cm的比色杯所测光汲取值为时，蛋白浓度约为 1mg/ml 。 假如实验所用的缓冲液和水有较高的光汲取值，说明缓冲液中有扰乱物质存在。 丈量方法和计算公式： 关于不含核酸污染的蛋白溶液 （假如样品光汲取值大于， 应将样品稀 释至光汲取值小于） ：选择蛋白缓冲液作为空白比较，测定 280 nm波优点的光