六味地黄颗粒对哮喘大鼠气道炎症抑制作用.doc

六味地黄颗粒对哮喘大鼠气道炎症的克制作用 及对肺组织扰乱素 -γ信使 RNA 表达影响的研究 1 王力宁  ※  王英 黄小琪  陈 晶  梁丽英  李志峰  陈平兰 欧海玲  文亦磊 广西中医学院第一隶属医院（广西南宁市东葛路  89-9  号  530023  ） [纲要 ] 目的：商讨滋阴补肾代表方六味地黄颗粒对过敏性大鼠哮喘模型气 道炎症的作用及其对肺组织扰乱素 -γ（IFN- γ）信使 RNA （mRNA ）表达的影响。方法：将 SPF 级 SD 雄性大鼠 160 只均衡下随机分红 8 组，除生理盐水组和空白比较组外，其余各组均以卵蛋白（ OVA ）辅以氢氧化铝凝胶为佐剂注射致敏， 2 周后雾化吸入 2%OVA 激发哮喘，成立哮喘模型。从实验第 8 天开始，给药组地塞米松、布地奈德雾吸给药， 六味地黄颗粒胃饲给药， 生理盐水组予生理盐水替 代 OVA 进行腹腔注射和雾吸。 空白比较组不予干涉。 造模时间为 28 天，取材后 高倍镜下察看各组大鼠气道及肺组织的病理学改变,采纳绝对荧光定量 RT-PCR 检测肺组织中 IFN- γ mRNA表达。结果：大鼠气道病理切片察看哮喘模型组的气 道上皮细胞零落较空白比较组和六味地黄颗粒治疗组高（ P＜0.05）；哮喘模型组大鼠肺组织 IFN- γ mRNA水平低于空白比较组（ P＜ 0.05）；六味地黄颗粒治疗组大鼠肺组织 IFN- γmRNA 水均匀高于哮喘模型组、六味地黄颗粒协助地塞米松 组、地塞米松组、生理盐水组（ P＜ 0.05）；六味地黄颗粒治疗组大鼠肺组织 IFN- γ mRNA 水平与布地奈德组、六味地黄颗粒协助布地奈德组对比无明显差别 （ P0.05）。结论：过敏性大鼠哮喘模型造模成功；六味地黄颗粒拥有减少哮喘 气道慢性炎症的作用， 其治疗哮喘的作用体制之一可能是经过上浮 IFN- γ mRNA 水平，克制哮喘的炎症性病变。 ※第一作者和通信作者信息：姓名： 王力宁 学历： 大学本科， 职称： 教授 主任医师 研究 方向： 以小儿哮喘与频频呼吸道感染的防治研究为研究方向 电话： 0771-5848435；传真： 0771-5862294  ； Email ： wln21@126.com 国家自然科学基金面上项目（项目同意号 ;广西科学基金立项课题（桂科自 0728182） ;国家教育部要点课题（课题编号 207088） [要点词 ] 哮喘；六味地黄颗粒；实验研究； IFN- γ；mRNA 支气管哮喘（简称哮喘）以气道慢性炎症、气道高反响性及气道重塑为特色。 最近几年来有逐年增添的趋势，愈来愈遇到人们关注。据报导 [1] ，在我国城区小孩哮喘的生病率为 1.97％,较十年前显然增添。我国传统医学在运用补肾法治疗哮喘方面很有研究 [2] ，笔者选择儿科始祖钱乙创制的滋阴补肾名方六味地黄丸颗粒剂配合糖皮质激素气道吸入， 察看其对哮喘大鼠气道炎症的作用及对肺组织中的扰乱素 -γ（Interferon-γ，IFN- γ）mRNA 表达的影响，旨在从基因水平上商讨六味地黄颗粒治疗哮喘的作用体制。现将实验过程报导以下： 资料与方法 1.1 实验动物 采纳 SPF 级 SD 雄性大鼠 160 只，4～6 周龄，体重 (150 ±20) g。上海斯莱克动物实验中心供给。（动物允许证号： SCXK( 沪)2007-0005）。 1.2 药物与剂量 六味地黄颗粒： 依据钱乙《小儿药证直诀》 中六味地黄丸的组方， 即熟地黄、山茱萸、山药、泽泻、牡丹皮、白茯苓，按 8：4： 4：3：3：3比率制成免煎中药饮片颗粒剂，每包括生药 10g。由江阴天江药业有限企业生产 （批号： 0903027）。温开水调制每毫升含生药 1g。地塞米松磷酸钠注射液 400mg/L，郑州羚锐制药股份有限企业生产（批号： 0807292）。吸入用布地奈德混悬液 1mg/2ml，由 Astra Zeneca pty Ltd企业生产（批号： 305597）。 1.3 试剂与仪器 卵清蛋白由恒因生物有限企业供给（批号： T2360 ）；氢氧化铝凝胶（分 析纯）由天津市博迪化工有限企业供给（批号：；RNAstore样本保留 液由天根生物（北京）科技有限企业生产； TIANScript cDNA 第一链合成试剂盒由天根生物（北京）科技有限企业生产。 压缩雾化吸入机由德国百瑞有限企业生产（型号： ARI-1205）；核酸扩增及时荧光检测系统由中山大学达安基因股份有限企业供给（型号： DA7600 ）；荧光定量 PCR检测系统由北京东胜创重生物科技有限企业供给 （型号： CFD-3200）由冷冻高速离心计， 德国 Eppendorf生产（型 号： 5417