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版细菌培养技术 版细菌培养技术 PAGE PAGE / NUMPAGESPAGE5 版细菌培养技术 PAGE 第二节 细菌培育检测技术 节概括 细菌的培育技术是微生物实验中基本技术之一。  大部分细菌均可用人工方法培育，  只有将细菌 培育出来才能对它进行研究和判定 知识点导航 一.培育基的种类 培育基（culturemedium ）是细菌生长生殖所需要的各样营养物质的人工制品。适合的培育 基 能使细菌在体外快速生长生殖，便于对细菌进行分别和鉴识。可分为基础培育基、营养培育基、 选 择培育基、鉴识培育基、厌氧菌用培育基和特别培育基。 （一）基础培育基 只含有细菌生长所需的最基本营养成分， 应用最宽泛，为制备多种培育基的基础， 常有的有 肉 汤培育基、琼脂培育基。 （二）营养培育基 在基础培育基中加入葡萄糖、血液、血清、腹水或酵母浸膏等有机物，可供营养要求较高的 细 菌生长需要或增菌用。如结核分枝杆菌培育基中增添鸡蛋、马铃薯、甘油等。 （三）选择培育基 利用不一样种类细菌对化学物质的敏感性不一样而制成， 使分别菌大批生殖而克制其余细菌生长 的 培育基。培育基中含有的克制剂能克制非目的菌生长或使其生长不好， 有益于目的菌的检出和识 别 。选择培育基多为固体平板，用于从标本中分别某些特定的细菌。 （四）鉴识培育基 培育基中加有某些特定成分，如糖、醇类和指示剂等， 用于检查细菌的各样生化反响， 以资 鉴 别和判定细菌。 （五）厌氧菌用培育基 专性厌氧菌须在无氧条件下才能生长， 故需在培育基中加入半胱氨酸、 硫乙醇酸钠等复原剂， 降低培育基中氧化复原电势，并应与外界空气隔断，使培育基自己为无氧的环境。 （六）特别培育基 为某些需要在特别条件下才能生长的基、改进Kagan氏培育基等。  细菌培育之用。如高渗盐增菌培育基、  高渗糖增菌培育 二.培育基的制备 制备一般培育基的主要过程基真相像，包含分配、熔解、调整 pH、过滤、分装、灭菌及检 定和 保留。 三.细菌查验室的注意事项及无菌技术 细菌培育一定随时为防备污染和病原菌的扩散而进行操作， 即无菌操作。细菌查验室的注意 事 项以下： ．细菌的培育应在接种罩或无菌室内进行。有条件的实验室可在超净工作台内进行。 ．用接种环分别和移种细菌时，用前用后均需灭菌办理。一般采纳火焰灭菌法。 ．从培育瓶或试管培育物中取标本或移种时，在翻开瓶口、管口或封闭前，均要在火焰上 经过 2～3次。切不行将含菌资料污染台面和其余物体。 4．如不慎将试管等打破造成菌液污染时，不要慌张，应马上报告负责人，而后用 3％来苏 或5％ 石炭酸办理污染台面或地面，起码浸泡 30分种。 5．工作完成后，用紫外光灯照耀 30分钟，或用 3％来苏擦抹台面，并冲洗双手。 四、接种环和接种针使用 接种环和接种针由三部分构成，即环（针）部分、金属柄部分和绝热柄部分。接种环和接种 针 往常采纳电热（镍）丝，环的直径随使用目的而不一样， 一般多为 2～4mm，环和针的长度为 40～ 50mm。 接种环（针）使用前后均应进行灭菌办理， 将接种环（针）尾端直立火焰中， 烧红镍丝部分， 再使接种环（针）金属柄旋转经过分焰 3次灭菌，冷却后用以取菌或待试标本。 使用接种环（针） 完 毕后马上将染菌的镍丝部分于复原焰（内焰）中加热，烤干环（针）端附着的细菌或标本，免得 环 （针）上剩余的细菌或标本因突受高热，爆烈四溅，而污染环境和致使传染危险。而后再移于氧 化 焰（外焰）中烧红灭菌，最后将金属柄部分来去在火焰中经过3次。用完后的接种环（针），应马上 放置于架上，切勿顺手弃置，免得灼焦台面或其余物品。 五、接种操作区 为防止在接种过程中污染环境以及空气中的细菌污染培育物， 接种均应在接种罩或无菌室内 进 行，别的细菌学实验室所必需的设备还包含无菌工作台、生物安全柜和生物安全实验室。 （一）接种罩 接种罩的式样好多，可用木框和玻璃制成，亦实用有机玻璃制成。接种罩在 用 前先以3％石炭酸或来苏轻拭，内需装有紫外线杀菌灯，用前可先行照耀，以保证罩内无灰尘和 细 菌。操作结束后，应马上清理内部，并作罩内消毒办理。 （二）无菌工作台又称超净工作台（supercleanbench式。经过变速离心风机将负压箱内经过预滤器过滤的空气压入静压箱，  ），当前多采纳垂直层流的气流形 再经高效过滤器进行二级 过 滤，从出风面吹出的干净气流，  以必定的和平均的断面风速经过工作区时，  将灰尘颗粒和微生物 颗 粒带走，进而形成无尘无菌的工作环境。  使用时应提早  50分钟翻开紫外线杀菌灯，  30分钟后关 闭并 启动送风机。净化区内禁止寄存不用要的物品，以保持干净气流型不受扰乱。 （三）无菌室 无菌室又称干净室（ clean room），是在实验室内部安