动物细胞工程高三生物一轮复习.ppt

动物细胞工程高三生物一轮复习; 植物细胞工程常用的技术 动物细胞工程常用的技术;概念：就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基上, 让这些细胞生长和增殖。;（一）过程;细胞贴壁：培养贴附性细胞的时候，细胞要能够贴附于底物上才能生长。 接触抑制：贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增长。 原代培养：动物组织消化后的初次培养，包括培养的第一代与第十代以内的细胞。 传代培养：将原代培养的细胞从培养瓶中取出，配置成细胞悬液，分装到两个以上的培养瓶中继续培养。;细胞贴壁过程;细胞在贴壁生长过程中,随着细胞分裂,数量不断增加,最后形成一个单层,此时细胞间相互接触,细胞分裂和生长停止。;单个细胞;（二）动物细胞培养的条件： 1.无菌无毒的环境 无菌操作并加抗生素 2.营养 葡萄糖，氨基酸，无机盐，微量元素，动物血清 3.温度和PH 与哺乳动物体温接近，PH为 4.气体环境 O2和CO2 ;（三）动物细胞培养的应用 生物制品：培养杂交瘤细胞获得病毒疫苗，干扰素，单克隆抗体等生物制品。 检测有毒物质：有毒物质可以引起培养动物细胞畸形或病变。 理论研究：通过培养正常或各种病变细胞进行生理，病理，药理等方面的研究;植物组织培养和动物细胞培养的比较; 二.动物体细胞核移植和克隆动物;卵细胞;;1、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？;（三）体细胞核移植技术的应用;阅读P49-50;（四）体细胞核移植技术存在的问题;三.动物细胞融合;原理：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝集，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 灭活：用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。;概念：指两个或多个动物细胞结合成一个细胞的过程。 结果:单核的杂交细胞。 原理：细胞膜的流动性。 诱导的方法：物理法：离心，振动，电激 化学法：PEG 灭活的病毒;四.单克隆抗体;B1;3.一个大胆的猜想： ???能够产生特定抗体的B淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞进行融合，形成杂交瘤细胞。 ;注射抗原;细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基喋呤阻断。人淋巴细胞有这两种途径，但一般不分裂增殖。骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在试管中混合，加PEG促融，而后在培养液中加氨基喋呤。;;通过恰当的稀释达到分离单个细胞进行培养的目的。 （1）取出阳性孔的细胞数进行计数 （2）用培养液将其稀释到10Cell／ml （3）如果在多孔板，每孔加，其几率为每孔内落入一个细胞 （4）根据检测的阳性结果可进行克隆化;② ②④;4.单抗的制备过程：;5.单克隆抗体的概念：;五.单克隆抗体的应用;用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体制备成“早早孕诊断试剂”。 受精后不久，胎盘滋养层细胞会分泌人绒毛膜促性腺激素（HCG)，是由受孕妇女体内胎盘产生的一种糖蛋白类激素，在妇女的尿液中大量存在，而非妊娠妇女尿液中几乎没有。;早孕试纸利用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体为配体，固定在层析住上，以胶体金为指示标记，检测尿液中HCG浓度，来确定妇女是否怀孕。 阳性：出现两条红色条带，一条位于对照区C，另一条位于检测区T，表明已怀孕。 阴性：仅在对照区C出现一条红性条带，在检测区T无红色条带出现，表明未怀孕。 无效：5分钟内在对照区C无红色条带出现，则测试失效或试纸已失效。;甲胎蛋白（AFP）是一种特异性较强的肿瘤标志物，用甲胎蛋白作为抗原免疫小鼠，制备抗AFP单抗，并与含有放射性同位素的标记物连接，单克隆抗体携带放射性标记物通过全身血液循环运送到所有组织，由于肿瘤细胞表面的AFP会和单克隆抗体特异性结合，所以放射性同位素标记物就不断积累在肿瘤上，通过一定的显影技术就可发现肿瘤所在。;生物导弹：用癌细胞作为抗原，免疫小鼠制备抗癌细胞的单克隆抗体，并与抗癌药物连接，便制成了生物导弹，注入患者体内，借助单克隆抗体的导向作用，将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞，这样既不损伤正常细胞，又减少了药剂用量。;（）关于现代生物技术应用的叙述，错误的是 A．蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质 B．体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体 C．植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒 D．动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育