基因工程 第五节 基因转化.pptVIP

第五章 目的基因导入受体细胞 第一节 受体细胞 受体细胞：可摄取外源DNA并使其稳定维持的细胞，具有应用价值或理论价值。 又称宿主细胞或寄主细胞， 成为受体细胞的条件： 便于重组DNA导入。 能使重组DNA分子稳定存在。 便于重组体的筛选。 遗传稳定性高，易于扩大培养。 安全，无致病性，环保。 蛋白酶缺失\含量低，利用表达蛋白积累。 遗传密码的使用无明显偏倚性。 有转译后加工机制（真核基因）。 在理论和实践上有较高的价值。 一、原核生物细胞 1、优势： 大部分没有纤维素组成的坚硬细胞壁，便于DNA进入。 没有核膜，染色体DNA没有固定结合蛋白质，这为外源DNA与染色体DNA重组减少了麻烦。 基因组简单，无线粒体和质体基因组，便于对引入的外源基因进行遗传分析。 原核生物多数为单细胞，容易获得一致性的实验材料，培养简单，繁殖迅速，周期短，重复快。 2、缺点： 无折叠系统，真核基因表达后，蛋白可能结构不正确 无修饰系统，真核基因表达后，蛋白不同被修饰。 E.coli.有蛋白酶，外源蛋白不稳定。 3、E.coli. 优点：繁殖快，培养简单，代谢易于控制。 缺点：有内毒素 4、枯草杆菌 具有大肠杆菌的所有优点。 基因表达产物可分泌到培养基中，简化蛋白的提取和加工。 真核生物的重组蛋白被分泌后便具有天然构象和生物活性。 无内毒素，安全。 二、真菌细胞 常用酵母菌 可进行无性繁殖的