蛋白质组学及技术介绍精品课件.pptVIP

;;;研究内容;研究技术;;;质谱法： 质谱（mass spectrum）是化合物分子在真空条件下受电子流的轰击或强电场等其他方法的作用，电离成离子，同时发生某些化学键有规律的断裂，生成具有不同质量的带电荷的离子，这些离子按质荷比m/z（离子的质量m与其所带电荷z的比值）的大小被收集并记录程谱的方法。 生物质谱技术是蛋白质组学研究中最重要的鉴定技术，其基本原理是样品分子离子化后，根据不同离子之间的荷质比（M/E）的差异来分离并确定分子量。对于经过双向电泳分离的目标蛋白质用胰蛋白酶酶解（水解Lys或Arg的-C端形成的肽键）成肽段，对这些肽段用质谱进行鉴定与分析。目前常用的质谱包括两种：基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）和电喷雾质谱（ESI- MS）。 ;;;;蛋白质组学的应用;在疾病及药物研究中的应用;在疾病及药物研究中的应用;在疾病及药物研究中的应用;在疾病及药物研究中的应用;蛋白质组学的研究技术;iTRAQ ;iTRAQ试剂 ?iTRAQ试剂是一种小分子同重元素化学物质，包括三部分：? 1.一端是报告部分 reporter group? 2.另一端是肽反应部分 peptide reactive group? 3.中间部分是平衡部分 balance group? reporter group：质量为114Da、115 Da、116 Da、117Da，因此iTRAQ试剂共四种； ??peptide reactive group：将reporter group与肽N端及赖氨酸侧链连接，几乎可以标记样本中所有蛋白质； ??balance group：质量为31 Da、30 Da、29 Da、28 Da，使得四种iTRAQ试剂分子量均为145 Da，保证iTRAQ标记的同一肽段m/z相同。 ;iTRAQ 试剂结构 ;操作流程;仪器;技术特点;荧光差异凝胶电泳;实验流程;仪器 荧光差异凝胶电泳系统Ettan DIGE 2D 试剂 1.样品标记 （1）染料 Cy2,Cy3,Cy5 与蛋白的赖氨酸的epsilon-氨基反应，产生三种带正电荷的荧光基团，在不同波长光激发下产生荧光。 ;2.一相等点聚焦 （2）IPG胶条水化液 （3）分离胶缓冲液 （4）平衡缓冲液 （5） 溴酚蓝溶液 ;4x 分离胶缓冲液;3.二相SDS;9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定。*** 10、低头要有勇气，抬头要有低气。**** 11、人总是珍惜为得到。***** 12、人乱于心，不宽余请。**** 13、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。***** 14、抱最大的希望，作最大的努力。**** 15、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么。。***** 16、业余生活要有意义，不要越轨。*** 17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。****