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* * 开颅法 麻醉动物,耳眼连线的中点垂直切开皮肤,通过钝性分离颞肌,开颅后暴露MCA,用电凝器横过嗅束旁的MCA使其凝闭,用10号手术丝线结扎MCA,造成MCA支配区局灶性脑缺血模型。 优点:实验条件恒定,缺血效果可靠,全身影响小,局部条件可控制。 缺点:需要开颅,创伤大,易感染。 光学法 将大鼠头部固定于立体定位仪上,切开皮肤,暴露颅骨,静脉注射光敏材料虎红酸钠,用特定冷光源(500--600nm)照射切口处颅骨,光线透过颅骨与血管内的光敏物质接触,激发光化学反应而产生单线态氧,直接损伤血管内皮细胞而诱导血栓形成。 优点:不开颅,手术创伤小,动物易长时间存活,血栓形成过程与人类近似,适用于抗血小板、抗血栓及内皮细胞保护药物的急慢性动物实验研究。 缺点:较早地导致终未动脉及微血管永久性闭塞,不利于扩血管及促进侧支循环作用的研究。 栓塞法 麻醉动物,将无菌干燥研碎筛滤的血凝块、碳素颗粒、塑料颗粒、花生四烯酸盐等作为栓塞剂,由颈外动脉注入栓子后结扎,开放CCA,栓子由颈内动脉(ICA)进入MCA,造成以MCA供血区脑组织损伤为主的缺血模型。 优点:不用开颅,操作较为简单。 缺点:无法预测栓塞部位与大小,脑组织缺血不一,不利于神经症状和脑组织定量分析。 Longas线栓法 麻醉动物,颈部正中切口,暴露并结扎CCA和ECA,在CCA分叉处剪一小口,插入4—0手术丝线,进入ICA17—20mm,阻断MCA起始端及其所有侧枝供应,在一定缺血时间后抽出丝线至CCA分叉处,进行再灌注。 检测指标 参照Zea Long评分标准,分别于大鼠术后清醒时、再灌注开始前后评分: 0分:无神经损害症状; 1分:不能完全伸展左侧前爪; 2分:向左侧转圈; 3分:行走时向左侧倾倒; 4分:不能自发行走。 Longas法的优缺点 优点:无需开颅,对动物病理刺激小。模型重复稳定性高,方法相对简单。 缺点:对动物体重要求严格,一般在250-300g间,且丝线粗细要适中。 改良线栓法 方法步骤:仅分离并结扎颈总动脉,于颈内外动脉分叉处插入线栓,而不分离颈外动脉和翼腭动脉。 优点,能精确控制缺血和再灌注时间,模型损伤评价高。 缺点:模型成功率高 二法比较 Longas法 改良法 神经功能评分 2.2±0.84 2.6±0.55 模型制作时间 30.83±4.62 20.17±4.88 成功率 83.33% 83.33% 死亡率 16.67% 0 梗死率 (23.03±7 .94)%(18.65±2.61)% *
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