柠檬酸发酵实验指导书.docVIP

第 PAGE \* Arabic 3 页 第二部分? 柠檬酸发酵实验?? 一、目的要求 了解利用黑曲霉生产柠檬酸的原理与流程，掌握柠檬酸的发酵生产工艺与发酵分析方法。通过本实验能较熟练地掌握真菌发酵的接种、培养与发酵产物的分析测定等技术。 二、基本原理 黑曲霉产柠檬酸多，耐酸力强；pH1.6~1.7时尚能生长，且酸度大时产生葡萄糖酸、草酸等副产物较少，故进行柠檬酸发酵时，培养液以pH2~3为宜。 用于柠檬酸生产的原料有淀粉、废糖蜜等；本实验以糖等为发酵原料，黑曲霉为产生菌。在一般发酵中，均产生多种酸，其中，低碳链的直链脂肪酸如甲酸、乙酸等称为挥发酸，而乳酸、柠檬酸等称为非挥发酸。挥发酸和非挥发酸的总和称总酸。酸的测定方法常采用中和法、电位滴定法及比色法等；若待测液色泽很深，可采用外指示剂法。本试验用中和法测定柠檬酸发酵中的总酸；柠檬酸的定性检验用Deniges试剂。 三、实验材料 1．菌种? 黑曲霉斜面菌种。 ?2．实验器材? ?0.1mol／L标准NaOH； 0.1mol／L H2S04；展开剂：正丁醇：甲酸：水=40：55：5； Deniges试剂(HgO 1g溶于20ml 0.2L／L H2S04中)； 酒精灯；滤纸，漏斗；烧杯：200ml，500ml；18X180试管；吸管10ml、5ml，150ml三角瓶；碱滴定管，铁台、蝴蝶夹：酚酞指示剂：200ml量筒；广