植物组织培养：第八章 人工种子.pptVIP

体胚发生的不同步性是普遍现象 在同一外植体上有不同发育阶段的体胚 * 体胚同步化的方法 同步脱分化促进细胞的同步分裂 加入DNA合成抑制剂（5氨基尿嘧啶） 过滤筛选法（简单实用) 渗透压分选法 球形胚的渗透压为17.5%，心形胚为12.5%，鱼雷胚为8.5%，子叶胚为0.5% 胚性细胞分级仪分离 原理：根据体胚不同发育阶段在溶液中具有不同的浮力而设计的，所用溶液一般为2%的蔗糖 繁殖体的包埋 包埋介质的要求： 无毒，并具有一定的缓冲强度 提供营养物质 含有适当的杀菌剂 常用人工胚乳配方 MS培养基加入1.5%的马铃薯淀粉水解物 SH（0.5x）培养基加入1.5%的麦芽糖 * 用海藻酸钠包裹体胚的方法 无菌操作，将体胚悬浮于2%-3%的海藻酸钠溶液中； 滴球法制作人工种子，0.1MCaCl2作为凝固剂； 用无菌水冲洗人 工种子2-3次； 在无菌条件下，在1/2MS上发芽、转换，或用外膜材料进行进一步的包装 * 愈伤组织在诱导培养基上产生体胚 体胚悬浮于2%-3%藻酸钠中 藻酸钠悬滴加入到0.1MCaCl2中 * 六、人工种子的储存 为了防止人工种子发芽，可采用的技术有： 低温储藏技术 低温可通过降低呼吸作用，使繁殖体进入休眠状态，常用4度，体细胞胚种子可储存1~2个月 液体石蜡储藏技术 可短时间保存（1个月） 超低温储藏技术 -80度以下，液氮（-196度） 七、人工种子的转换试验（萌发） 转换：就是指被包裹的体胚或不定芽在一定条件下萌发生长，形成完整植株的过程。 （一）无菌条件下的转换 MS琼脂固体培养基 （二）土壤条件下转换的研究 * 八、主要问题 1．如何得到数量多，质量高，出苗整齐一致，即同步化的体胚和不定芽； 2．选择什么材料作为体胚的包裹剂，才能达到既不损伤体胚，又有利于发芽、生长，并经得起加工、贮藏、运输的过程。 3．在胶囊里加入什么物质防腐、防干，使体胚正常生长，提高从体胚到正常植株的转换率。 4．如何进行机械化操作，进行大量制种和大田播种。 九、应用前景 在下列几个方面应用 1．杂交稻快繁F1杂交品种； 2．马铃薯遗传不稳定,不能用种子繁殖； 3．块茎病毒难于贮藏； 成本远高于自然种子 思考题 1．人工种子与天然种子比较有何优点？还存在着哪些问题有待解决？ 2．人工种子研制的操作程序是什么？ 3．什么型的胚适于制作人工种子？ 4．体胚选择纯化方法有哪几种？ 5．人工种子转换试验？ 《无心法师》：人类的再生能力？干细胞 * 半夏：药用植物，可镇咳、镇吐、祛痰、抗肿瘤等 在上世纪五六十年代，野生资源还能满足市场的需求，但自70年代以后，全国半夏需求量增大，当时，价格的上扬导致滥采滥挖现象愈益严重，野变家种因单产低的技术未能突破。主产区广西 * Development of somatic embryos from a transgenic plant; B. Somatic embryos after ABA treatment. C. Somatic embryos after desiccation treatment. D. Germination of desiccated embryos. E. Development of plants from desiccated somatic embryos. F. Development of plants from somatic embryos without desiccation. 干燥：减少含水量 * 种薯不带病毒，增产可达40%以上。 微型薯百粒重为100-300克 * * * 小规模试验，逐个选择，选子叶胚和鱼雷胚，活力比心形胚高，耐包裹，作成人工种子后，发芽率高，转换率高。 用不同孔径的滤网过滤。 中科院植物所研究发现：向日葵的幼胚在发育过程中，渗透压有明显的变化，球形胚的渗透压为17.5%，心形胚为12.5%，鱼雷胚为8.5%，子叶胚为0.5%，所以体胚由小到大的过程是渗透压不断降低的过程。利用此发现，可以控制渗透压，使体胚停留于发育的某一个阶段，从而选择得到较为一致的体胚。 分级仪:重庆师范学院曾研制过，其原理是根据体胚不同的发育阶段在溶液中具有不同的浮力而设计的，所用溶液一般为2%的蔗糖。 防止发芽 *  第八章 人工种子 人造鸡蛋？ 种子的结构 三部分：Embryo + Endosperm + Testa 双子叶 单子叶 * 一、细胞全能性（Totipotency） 指细胞能够发展成为一棵完整植株的能力 细胞学说：细胞是生物体结构和功能的基本单位 遗传学理论：每一个细胞都具有生物体全部的遗传物质 基于： 二、概念 人工种子（Synthetic/Artificial seeds）是将组织培养产生