医院HIV实验室诊断.pptxVIP

HIV实验室诊断;一、HIV的一些相关知识： 1. HIV的结构 2. HIV基因组成及结构 3. HIV感染的免疫反应 二、HIV的实验室检查 1. 实验室、人员及设备要求 2. 实验室检测 3. 职业暴露 ;;2、HIV的基因分型 HIV可分为两个型：HIV-Ⅰ和HIV-Ⅱ。 (1) 基因组成： Ⅰ: LTR-gag-pol-vif-vpr-tat-rev-vpu-env- nef-LTR. Ⅱ: LTR-gag-pol-vif-vpx-vpr-tat-rev-env- nef-LTR. 结构基因： gag、pol、 env 调节基因： tat、rev、nef、 vif、vpu 附属基因： vpr、vpx;;(3) 两者的主要区别： ① Ⅰ型含有vpu，而Ⅱ型含vpx。 ② vpr和nef与其他基因的关系也不同： A HIV-Ⅰ的vpr与vif相互重叠，而nef 与env不重叠； B HIV-Ⅱ的vpr与vif不重叠，而nef与 env相互重叠。; (4) 基因表达产物： HIV-Ⅰ HIV-Ⅱ env：gp160 gp120 gp41 gp140 gp105 gp36 gag： p55 p24 p18 p56 p26 p16 pol： p65 p51 p31 p68 p53 p34 ;3.HIV感染的免疫反应 ;实验室要求 ： 实验室分级：初筛实验室 确证实验室 粤卫[2004]305号文规定：05年6月份前在 县级以上收治定点医院建立初筛实验室。 填写申请、评审、批准 要求： HIV血清学试验：BSL- Ⅱ(P2) HIV病毒研究： BSL- Ⅲ P3); 初筛实验室设计和建造的要求： ⑴ 有专用实验室（至少专用检测台），应划分清洁区和污染区，并有明显标记，有充足的操作空间。 (2) 实验室墙面、地面、台面材料应来耐酸、碱、易清洁消毒、不渗漏液体；室内应有防蚊、防蝇、防鼠等设备;⑶ 检验台上应装置紫外灯。 ⑷ 备有消毒药品、消毒器材和消毒设备。 ⑸ 有感应流水装置，备有冲眼睛水，足够的 一次性手套、口罩、隔离服和防护眼镜。 (6) 实验室应装置恒温设备,室温为20~25℃。;BSL Ⅱ实验室： 设计和建造的要求（ 增加）： ⑴ 应有专门放置生物废弃物容器的台(架)。 ⑵ 应设置实施各种消毒方法的设施，如高压灭 菌锅、化学消毒装置等对废弃物进行处理。 ⑶ 应设置洗眼装置。 ⑷ 实验室门宜带锁、可自动关闭。 ⑸ 实验室出口应有发光指示标志。;BSL Ⅱ实验室： 安全设备： Ⅱ生物安全柜或其他物理抑制设备;HIV抗体初筛检测程序： ;HIV抗体的检测： 1.初筛试验方法及原理： （1）ELISA （2）明胶凝集试验 （3）金标法 （4）自动化仪器测定;2.确证试验：免疫印迹法、间接免疫荧光法、免疫沉淀法 (1) 方法原理 (2) 确证试验结果判断： 美国CDC：gp160/gp120或p24/gp41 任意二条带 美国FDA：gp160/gp120或p24、gp41、p31 三者 组合 WHO：至少二条以上env带 美国红十字：gag、pol、env每组至少一条带 中国：至少二条以上env带或一条env带和一条 (gag)p24带。;3 注意事项 (1) 相关的政策和规定 (2) 临床操作中的注意事项 (3) 初筛与确证结果的差异及解释 (4) 医疗纠纷;医务人员艾滋病病毒职业暴露防护工作指导原则(试行)(2004.5.31) ： 第八条 医务人员发生艾滋病病毒职业暴露后，应当立即实施以下局部处理措施：;1 用肥皂液和流动水清洗污染的皮肤，用生理盐水冲洗粘膜。 2 如有伤口，应当在伤口旁轻轻挤压， 尽可能挤出损伤处的血液，再用肥 皂液和流动水进行