中药臭灵丹抗流感病毒活性成分分离及其药效机制研究.pdfVIP

中药臭灵丹抗流感病毒活性成分分离及其药效机制研究 目的：从传统中药臭灵丹中分离纯化具有确切抗流感病毒的活性成分(群), 并分析化学成分组成,以明确其药效物质基础。研究活性成分对不同亚型流感病 毒,包括人及禽流感病毒活性,明确抗病毒谱及活性强度,并进一步分析不同活性 成分对流感病毒感染诱导的相关宿主信号通路和细胞因子、趋化因子影响,从而 阐明臭灵丹的抗流感病毒药理机制,为其临床应用提供科学依据。 方法：通过甲醇、乙醇等不同极性溶剂对臭灵丹药材进行分离提取纯化,获 得提取物及不同活性组分,以噻唑蓝染色法(MTT法)检测各个提取物或组分的体 外细胞毒性,以细胞病变抑制法筛选其体外抗流感病毒药效及对不同亚型流感病 毒的抗病毒谱,以UHPLC-QTOF MS 对活性组分进行成分分析及指认。利用蛋白免 疫印迹技术检测活性组分对流感病毒感染相关的宿主细胞信号通路影响,包括 NF- κB, P38/MAPK, ERK/MAPK 等,以实时荧光定量PCR 技术检测活性组分对流 感病毒诱导的细胞因子及趋化因子信使RNA (mRNA)表达水平影响,利用Bio-Plex 悬浮芯片系统验证细胞因子及趋化因子在蛋白水平表达变化,并通过小鼠流感病 毒性肺炎模型研究活性组分体内抗病毒药效及其机制。 成果：(一)臭灵丹乙醇提取物体内、外抗流