生化分析试题.docVIP

1、 简述盐析的定义、原理及应用 定义： 增加中性盐浓度使蛋口质、气体、未带电分子溶解度降低的现彖。是蛋口质 分离纯化屮经常使用的方法，最常用的屮性盐有硫酸鞍、硫酸钠和氯化钠等。 原理： 加入某种电解质盐析剂，这种加入的盐析剂，其离了的水合作用比原溶 液中其它盐较强，它使溶液中自由水分子数减小，从I佃捉高溶液屮欲结品 物质在溶液中的有效浓度，使欲结晶物质在溶液中结晶析出。 应用：胶体凝聚如豆腐的制作，乙酸乙酯等的提纯萃取及浓缩，生物大分析 试样的粗制 2、 简述透析的基本操作、注意事项及应用 基本操作： 将待分离或纯化样品封入由半透膜组成的透析袋里，然后将袋子放入低离子 强度的透析液屮，此吋袋内分子量小于透析袋截留分子量的分子可通过膜进入透 析液，从而实现大分子与小分子物质的分离。 注意事项： 透析过程实现平衡大约需要4~6 h因此通常应在4比左右进行，并需进行搅 拌，勤换透析液或采用较大量透析液可加速该过程。 应用： 大分子样品中去除盐类及其它小分子（如有机溶剂等）；去除与大分子结合较 弱的小分了或离了（透析液中加入适量螯合剂可加快该过程）；利用透析平衡可 以测定大分子（蛋白质或核酸）与小分子间的结合常数。试样浓缩：可直接用吸 收剂（聚乙二醇）吸收 3、 简述速率区带离心法与等密度离心法的操作及应用 速率区带离心法： 离心前在离心管内先装入密度梯度介质，将待分离样品轻轻铺在密度梯