快速检测新型冠状病毒的等温扩增引物组及其检测试剂盒发明专利.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 112899402 A (43)申请公布日 2021.06.04 (21)申请号 202110278370.1 C12N 15/11 (2006.01) (22)申请日 2021.03.15 (71)申请人 东南大学 地址 211102 江苏省南京市江宁区东南大 学路2号 申请人 徐州淮海生命科学产业研究院有限 公司 (72)发明人 张宇　庄林林　马明　吉永新　 王建国　 (74)专利代理机构 南京苏高专利商标事务所 (普通合伙) 32204 代理人 王艳 (51)Int.Cl. C12Q 1/70 (2006.01) C12Q 1/6844 (2018.01) 权利要求书1页 说明书17页 序列表2页 附图9页 (54)发明名称 快速检测新型冠状病毒的等温扩增引物组 及其检测试剂盒 (57)摘要 本发明公开了快速检测新型冠状病毒的等 温扩增引物组及其检测试剂盒，所述检测试剂盒 由病毒核酸等温扩增试剂和荧光免疫层析定量 检测试纸条、运行缓冲液组成。病毒核酸等温扩 增试剂包括反应缓冲液、新型冠状病毒ORF1ab （RdRP）、N基因特异性扩增引物和质控品。本发明 的病毒核酸等温扩增反应完成后加入运行缓冲 液，混匀滴加到试纸条加样窗口，2分钟后检测荧 光信号。本方法可在1小时内完成。本发明新型冠 状病毒检测方法操作简便、安全，灵敏度高、特异 性强，有利于实际应用。 A 2 0 4 9 9 8 2 1 1 N C CN 112899402 A 权　利　要　求　书 1/1页 1.等温扩增引物组，其特征在于，所述等温扩增引物组包括Orf1ab基因引物组和/或N 基因引物组，所述Orf1ab基因引物组包括正向引物Orf1ab‑F、反向引物Orf1ab‑R和反向引 物En‑Orf1ab‑R；所述N基因引物组包括正向引物N‑F、反向引物N‑R和反向引物En‑N‑R，所述 正向引物Orf1ab‑F序列如SEQ  ID NO：1所示，所述反向引物Orf1ab‑R序列如SEQ  ID NO：2所 示，所述反向引物En‑Orf1ab‑R序列如SEQ  ID NO：3所示，所述正向引物N‑F序列如SEQ  ID  NO：4所示，所述反向引物N‑R序列如SEQ  ID NO：5所示，所述反向引物En‑N‑R序列如SEQ  ID  NO：6所示。 2.根据权利要求1所述的等温扩增引物组，其特征在于，所述正向引物Orf1ab‑F、反向 引物Orf1ab‑R和反向引物En‑Orf1ab‑R摩尔比范围为1：1：1    1：3：3；所述正向引物N‑F、反~ 向引物N‑R和反向引物En‑N‑R摩尔比范围为1：1：1    1：3：3。~ 3.权利要求1或2所述的等温扩增引物组在制备检测新型冠状病毒的试剂盒中的应用。 4.一种快速检测新型冠状病毒的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1或2 所述的等温扩增引物组。 5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述等温扩增引物组的引物上标记有特 定标记物，选自生物素、地高辛、FAM、异硫氰酸荧光素、Cy3或Cy5荧光染料中的一种或几种。 6.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括等温扩增缓冲液、Bst  DNA聚合酶、dNTPs、聚乙二醇、甜菜碱、无酶水、阳性对照和阴性对照。