生物化学实验课件西南科技大学生命科学与工程学院首页.pptxVIP

不同植物样品可溶性蛋白含量和多肽组分的差异;实验目的;;一、不同植物样品可溶性蛋白的提取;　离心机基本原理;⒉相对离心力（relative centrifugal force，RCF）由于各种离心机转子的半径或者离心管至旋转轴中心的距离不同，离心力而受变化，因此在文献中常用“相对离心力”或“数字×g”表示离心力，只要RCF值不变，一个样品可以在不同的离心机上获得相同的结果。 　　RCF就是实际离心场转化为重力加速度的倍数。 RCF＝F离心力/F重力＝ m ω2X/mg=1.118×10－5 . N . X N（rpm）=RCF×105 /（1.18×X） 式中X为离心转子的半径距离，以cm为单位；g为地球重力加速度（980cm/sec2）；N为转子每分钟的转数（rpm）。 ;植物细胞破碎后通过差数离心形成的沉淀;实验注意事项： 整个操作过程在0－4℃低温下进行； 研磨必须充分； 加蛋白酶抑止剂（PMSF 苯甲基磺酸氟）或抗氧化剂； 提取的蛋白一般需要分装后，在液氮或－80℃低温下保存。 ;实验材料、试剂与仪器设备;（二）试剂 1．提取缓冲液：0.125 mol 的Tris-HCl, pH7.0，称取12.5gTris于烧杯，用适量双蒸水溶解，HCl调pH至7.0,定容至1000ml。 2．聚乙烯吡咯烷酮（PVP） 3．β-巯基乙醇 （三）设备