发酵——种子的扩大培养.pptVIP

2021/9/12 * 2,厌氧培养:对于酵母菌（啤酒,葡萄酒,清酒等） 试管→三角瓶→卡式罐→种子罐 对于产孢子能力不强或孢子发芽慢的菌种,如产链霉素的灰色链霉菌、产卡那霉素的卡那链霉菌可以用摇瓶液体培养法。将孢子接入含液体培养基的摇瓶中,于摇瓶机上恒温振荡培养,获得菌丝体,作为种子。 试管→三角瓶→摇床→种子罐 2021/9/12 * 2、培养基选择的原则 培养基的选择应该是有利于菌体的生长,对孢子培养基应该是有利于孢子的生长。 在原料方面,实验室种子培养阶段,规模一般比较小,因此为了保证培养基的质量,培养基的原料一般都比较精细。 2021/9/12 * 3、起始接种物的传代问题 细菌 保藏斜面 → 活化斜面 产孢子 保藏 → 母斜面 → 子斜面 目的:使菌种的传代次数尽可能的少。 2021/9/12 * 母瓶:活化、纯化,使保藏菌种生长,并去处变异株。 所以接种时要稀一点、便于纯化生长到单菌落。 子瓶: 大量繁殖,得到大量孢子。 接种:①从母斜面上点接种,选取生长好的单菌落 ②接种时密一点,得到大量的孢子。 孢子培养时注意湿度,子斜面使用一般不超过1个月 孢子培养 2021/9/12 * 三、生产车间阶段 1、培养物的选择原则 在生产车间阶段,最终一般都是获得一定数量的菌丝体。 缩短发酵时间 有利于获得好的发酵结果 菌丝体比孢子要有利: 2021/9/12 * 2、培养基选择的原则 目的:获得一定数量和质量的菌体,因此培养基的选择应首先考虑的是有利于孢子的发育和菌体的生长,所以营养要比发酵培养基丰富。 在原料方面:不如实验室阶段那么精细,而是基本接近于发酵培养基,这有两个方面的原因: 一是成本 二是驯化 2021/9/12 * 例:柠檬酸发酵 以蔗糖为原料 成分 斜面 种子罐 发酵 麦芽汁 麦汁 蔗糖 2.5-5% 20% NH4NO3 0.225% 0.11% K2HPO4 0.03% MgSO4.H2O 0.025% 0.025% KCl 0.015% 琼脂 2% 2021/9/12 * 薯干粉 成分 斜面 种子罐 发酵 麦芽汁 麦汁 薯干粉 10% 22-28% (NH4)2SO4 0.5% 琼脂 2% 2021/9/12 * 3、发酵级数的确定 谷氨酸:三级发酵 一级种子（摇瓶）→二级种子 （小罐）→发酵 青霉素:三级发酵 一级种子 （小罐）→二级种子（中罐）→发酵 一般由菌丝体培养开始计算发酵级数,但有时,工厂从第一级种子罐开始计算发酵级数 2021/9/12 * 发酵级数确定的依据 级数受发酵规模、菌体生长特性、接种量的影响 级数大,难控制、易染菌、易变异,管理困难,一 般2-4级。 在发酵产品的放大中,反应级数的确定是非常重要 的一个方面 2021/9/12 * 细菌:二级发酵 茄子瓶→种子罐→发酵罐 霉菌:如青霉菌,三级发酵 孢子悬浮液→一级种子罐（27?C,40小时孢子发芽）→二级种子罐（ 27?C,10~24小时）→发酵罐 放线菌:四级发酵 酵母:比细菌慢,比霉菌,放线菌快,通常用一级种子 常用微