第6章植物基因工程.pptxVIP

第六章 植物基因工程;第一节 植物基因工程的发展现状;植物基因工程;转基因植物的理论前景和意义;高等植物基因工程的发展历程;抗虫转基因植物;抗病转基因植物;抗除草剂转基因植物;转鱼抗寒蛋白基因的番茄;转黄瓜抗青枯病基因的甜椒;利用转基因改良植物的品质;提高观赏价值;;;;;;第二节 植物基因工程方法; 一 原生质体介导法;1 PEG介导的基因转化;2 脂质体介导基因转化;3 电激法介导基因转化;４显微注射介导的基因转化;５激光微束介导的基因转化;二 基因枪法（微弹轰击法）;操作步骤; 转化率影响因素 ;三、根癌杆菌介导法;;;Ti 质粒的结构与功能;T-DNA的染色体整合机制; Ti质粒是植物基因工程的一种天然载体，但野生型Ti质粒直接作为植物基因工程载体存在着学多障碍： （1） 质粒过大，造作困难 （2）大型的Ti质粒有多个酶切位点 （3）植物激素类的影响 （4） Ti质粒??存在不起作用的序列 （5） Ti质粒的局限性;Ti 质粒的改造;;二元整合转化程序;2　根癌农杆菌Ti质粒介导的基因转化的分子机理 6个步骤： 1）农杆菌对受体的影响 （2）农杆菌附着到植物受体细胞 （3）诱导启动毒性区基因表达 （4）类似接合孔复合体的合成和装配 （5）T-DNA的加工和转运 （6）T-DNA的整合;3. T-DNA转移的影响因素 （1）农杆菌菌株 （2）农杆菌菌株高侵染活力的生长时期 （3）基因活化的诱导物 （4）外植体的类型和生理状态 （5）外植体的预培养 （6）外植体的接种及共培养;基因枪法与根癌农杆菌介导发的比较 ;第三节 转化子细胞的筛选;;;一、植物基因工程中的选择基因;1、新霉素抗性基因（neor）;2.庆大霉素抗性基因（gentr）;3.潮霉素磷酸转移酶（HTP）基因（hpt）;4.膦丝菌素乙酰转移酶基因（bar）;二、报告基因;;; ? -葡萄糖苷酸酶基因（gus）;氯霉素乙酰转移酶基因;3.荧光素酶基因;第四节 转化体的鉴定与证实;转化体的鉴定和证实的必要性;PCR检测外源基因的整合;Southern杂交检测外源基因的整合;RT-PCR检测外源基因的表达;Northern杂交检测外源基因的表达;Western杂交检测外源基因表达的产物;第五节 植物基因工程研究的应用和展望;; 一 抗性基因工程; 二 植物品质改良基因工程;;三 植物杂种优势的利用; 四 植物代谢工程;重点;;高等植物的基因表达系统;外源基因的四环素诱导系统;外源基因的四环素诱导系统;外源基因的四环素诱导系统;外源基因的四环素诱导系统;外源基因的乙醇诱导系统;外源基因的乙醇诱导系统;外源基因的地塞米松诱导系统;外源基因的地塞米松诱导系统;外源基因的地塞米松诱导系统;外源基因的类固醇诱导系统;外源基因的类固醇诱导系统