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方法名称 水质总大肠菌群和粪大肠菌群的测定
（纸片快速法）
申请人
项目负责人员 制定原因
验证检测方法符合实验 室要求、确保数据准确性与有效性
方法适用围 适用于地表水、地下水与废水中的总大肠菌群和粪大肠菌群的快速测定。方法来源 HJ 755-2015 《水质 总大肠菌群和粪大肠菌群的测定纸片快速法》
仪器、试剂和环境的要求
仪器和设备
高压蒸汽灭菌器
培养箱
冰箱
采样瓶
试管
水质总大肠菌群和粪大肠菌群测试纸片
试剂： 2.1 硫代硫酸钠 2.2 乙二胺四乙酸二钠
采样和测试过程中，所用到的玻璃器皿需灭菌后方可使用。
方法描述
按MPN法，将一定量的水样以无菌操作的方式接种到吸附有适量指示剂 （溴甲酚紫和 2,3,5- 氯化三苯四氮唑即 TTC）以与乳糖等营养成分的无菌滤纸上，在特定的温度（ 37℃或44.5 ℃）培养 24h，当细菌生长繁殖时，产酸使pH值降低，溴甲酚紫指示剂由紫色变黄色，同时，产气过程相当的脱氢酶
在适宜的 pH围，催化底物脱氢还原 TTC形成红色的不溶性三苯甲（ TTF）。即可在产酸后的黄色背景下显示出红色斑点 （或红晕）。通过上述指示剂的颜色变化就可对是否产酸产气作出判断，从而确定是否有总大肠菌群或粪大
肠菌群存在，再通过查 MPN表就可得出相应总大肠菌群或粪大肠菌群的浓度值。
检测结果的判断
结果判读：
制片上出现红斑或红晕且周围变黄，为阳性。
纸片全片变黄，无红斑或红晕，为阳性。
纸片部分变黄，无红斑或红晕，为阴性。
纸片的紫色背景上出现红斑或红晕，而周围不变黄，为阴性。
纸片无变化，为阴性。
结果计算：
根据不同接种量的阳性纸片数量，查 MPN表得到 MPN值，按公式换算并报告 1L水样中总大肠菌群或粪大肠菌群数：
C=100*M/Q
式中：
C—水样总大肠菌群或粪大肠菌群浓度（ MPN/L） M—查MPN表得到的 MPN值(MPN/100ml) Q—实际水样最大接种量（ ml）
100—为10*10ml ，其中， 10将MPN值的单位 MPN/100m转l
为MPN表中最大接种量。
结果表示：
换为 MPN/L，10ml
测定结果保留二位有效数字， 大于等于 100时以科学计数法表示， 结果的单位为MPN/L。平均值以几何平均计算。
附件说明 表 1
运行说明 经验证该方法符合我实验室使用。
审批意见
技术经理： 日 期：
总经理： 日期：
表 1
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